泰山白首烏化學(xué)成分及生物活性研究.pdf

1、白首烏為蘿藦科鵝絨藤屬植物，有三個(gè)品種，分別為戟葉牛皮消、耳葉牛皮消和隔山牛皮消。其中，耳葉牛皮消和隔山牛皮消主要產(chǎn)地為江蘇濱海一帶，研究較多，現(xiàn)已大面積種植；戟葉牛皮消主產(chǎn)地為山東泰山，所以又名泰山白首烏，與四葉參、黃精、紫草并稱為泰山四大名藥，多為野生，藥材來之不易，研究較少，特別是對(duì)其化學(xué)成分及生物活性方面的系統(tǒng)研究更少。
　　泰山白首烏為戟葉牛皮消的塊根，味苦而甘澀，性微溫，無毒；能收斂精氣，烏須黑發(fā)，為滋養(yǎng)、強(qiáng)壯、補(bǔ)血良

2、藥；主治久病虛弱，須發(fā)早白，貧血，腰膝酸軟，神經(jīng)衰弱，慢性風(fēng)痹，痔瘡，陰虛久瘧，腸出血，潰瘍久不收口等。鮮的泰山白首烏還有潤(rùn)腸通便的功用，可適用于老人便秘。本文主要對(duì)泰山白首烏化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)研究，并對(duì)分離得到的單體化合物進(jìn)行抗氧化活性篩選。
　　目的：是豐富泰山白首烏的藥理作用，研究泰山白首烏中羥基苯乙酮類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)對(duì)抗氧化活性的影響。
　　方法：泰山白首烏干燥根6.7 kg，分別用80％、60%、60%乙醇回流提取

3、3次，時(shí)間分別為0.5h、1h、1h，過濾，濾液濃縮得浸膏，浸膏加水混懸后，分別加石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯，各萃取3次，得石油醚部分、二氯甲烷部分、乙酸乙酯部分和水層母液，備用。將以上各部分別采用硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜、ODS柱色譜、制備HPLC色譜和重結(jié)晶等手段從泰山白首烏中分離純化化學(xué)成分，根據(jù)其理化性質(zhì)，運(yùn)用MS， IR，UV，1H-NMR，13C-NMR，二維譜等波譜方法，參考文獻(xiàn)報(bào)道的數(shù)據(jù)，對(duì)所分得的

4、單體化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。同時(shí)，富集泰山白首烏中的羥基苯乙酮類化合物及與羥基苯乙酮結(jié)構(gòu)類似的化合物，為下一步的生物活性試驗(yàn)做準(zhǔn)備。
　　采用 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)法，體外模擬自由基氧化過程，以傳統(tǒng)的抗氧化劑維生素C為對(duì)照，將從泰山白首烏中分離得到的苯乙酮類化合物與苯乙酮結(jié)構(gòu)類似的化合物配制成不同濃度，分別與一定濃度的DPPH反應(yīng)相同的時(shí)間。通過測(cè)定吸光度，得到清除率與濃度的線性曲線

5、，計(jì)算出各化合物清除DPPH的IC50值，通過比較IC50值確定各化合物的抗氧化能力強(qiáng)弱。另外，根據(jù)化合物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，推斷泰山白首烏中苯乙酮類化合物及與苯乙酮結(jié)構(gòu)類似化合物抗氧化性的作用機(jī)理。
　　結(jié)果：從泰山白首烏塊根中分離得到12個(gè)化合物，分別鑒定為：β谷甾醇（β-sitosterol）（1）；4-羥基苯乙酮（p-Hydroxyacetophenone）（2）；2，4-二羥基苯乙酮（2,4-Dihydroxyacetophen

6、one）（3）；2，5-二羥基苯乙酮（2,5-Dihydroxyacetophenone）（4）；3-羥基苯乙酮（m-Hydroxyacetophenone）（5）；白首烏二苯酮（Baishouwuhenzophenone）（6）；白首烏乙素(2,6,2′-trihydroxy-3-acetyl-4′-(2′′,6′′-dihydroxy-3′′-acetyl)phenyl-6′-methyl-benzophe-none)（7）；白樺脂

7、酸（Betulinci acid）（8）；對(duì)苯二酚（Hydroquinone）（9）；琥珀酸（Succinic acid）（10）；胡蘿卜苷（Eleutheroside A）（11）；戟葉牛皮消苷-C（Bungeiside-C）（12）。其中3-羥基苯乙酮（5）為首次從該植物中分離得到的化合物。
　　通過DPPH法測(cè)定各化合物的IC50值，比較其抗氧化能力。各化合物抗氧化能力大小排序依次為：維生素C＞對(duì)苯二酚＞2,5-二羥基苯乙酮

8、＞白首烏二苯酮＞＞2,4-二羥基苯乙酮＞白首烏乙素＞3-羥基苯乙酮。以上結(jié)果表明，苯乙酮類化合物體外清除DPPH自由基的能力與其化學(xué)結(jié)構(gòu)有關(guān)，主要取決于苯環(huán)上對(duì)位的羥基；其次還取決于羥基的個(gè)數(shù)。
　　結(jié)論：從泰山白首烏的乙醇水提取物中分離得到的12個(gè)化合物，其中3-羥基苯乙酮（5）為首次從該植物中分離得到的化合物。體外抗氧化活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，影響羥基苯乙酮類化合物抗氧化能力的主要因素是苯環(huán)上對(duì)位的羥基和羥基的個(gè)數(shù)，為泰山白首烏及鵝