鴉膽子化學成分及生物活性研究.pdf

1、系統(tǒng)分析傳統(tǒng)藥用植物的化學成分，是發(fā)現具有生物活性先導化合物的重要途徑之一。苦木科(Simaroubaceae)鴉膽子屬（Brucea）植物共有6種，主要分布在東半球熱帶地區(qū)，為灌木或小喬木，生于海拔950～1000m之間的石灰山疏林中。我國有2種，為柔毛鴉膽子和鴉膽子，均產自東南部、南部和西南部的福建、臺灣、兩廣、海南、貴州和云南等地。鴉膽子(Brucea javanica L.Merr)在我國民間主要以種子入藥，可清熱解毒，主要治療

2、痢疾、瘧疾，贅疣、雞眼及腫瘤等。
　　我們對鴉膽子進行了系統(tǒng)的化學成分研究，并對得到的部分苦木素類化合物進行了抑制腫瘤細胞增殖作用的活性評價。通過硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜、RP-18柱色譜、半制備HPLC等方法，從鴉膽子種子乙醇提取物中分離得到30個化合物，通過波譜學技術將得到的化合物進行鑒定為:12個苦木素類化合物:brusatol(1),bruceanic acid E(2),dehydrobrucein

3、e B(3),dehydrobrusatol(4),dehydrobruceantinol(5),dehydrobruceine A(6),bruceine B(7),bruceine D(8),bruceoside A(9),yadanzioside M(10),yadanzioside G(11),yadanzioside A(12);4個木脂素類化合物:cleomiscosin A(13)，cleomiscosin B(14)，c

4、leomiscosin C(15)，spicatolignan B(16);1個黃酮類化合物:luteolin(17);2個生物堿類化合物:aurantiamide acetate(18)，11-hydroxycanthin-6-one(19);4個甾體類化合物:β-sitosterol(20)，daucosterol(21)，stigmasterol-β-D-glycoside(22)，7-oxositosteryl-β-D-gluc

5、opyranoside(23);4個苯丙素類化合物:2,3-dihydroxy-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-propan-1-one(24),vanillin(25),vanillic acid(26)，hydroxybenzoic acid(27);兩個脂肪酸類化合物:laportoside A(28)，1-oleoyl-glycerol(29)，9，10-dihydroxystearic acid(3

6、0)。其中化合物16，18，22，23，24，28，29，30為首次從鴉膽子中分離得到。
　　采用MTT法檢測了部分化合物的腫瘤細胞增殖抑制活性，結果表明，苦木素類化合物1-8對A549，NCI-H292，MSTO-211H細胞株均表現出一定的細胞增殖抑制活性。其中化合物1具有很強的A549細胞增殖抑制活性(IC502.83μM);化合物3和5對NCI-H292和MSTO-211H細胞比較敏感，其IC50范圍在0.3～1.0μM;

7、化合物2，4，6-8，15對NCI-H292和MSTO-211有不同程度的劑量依賴性細胞增殖抑制活性，IC50范圍為0.47～19.1μM。
　　我們選擇化合物dehydrobruceine B(DHB)進行了進一步實驗研究。采用Annexin V/FITC-PI雙染法通過流式細胞術檢測結果表明，DHB可以誘導A549和NCI-H292細胞凋亡產生，進一步研究結果表明，化合物DHB可以誘導細胞內ROS的產生和線粒體膜電位的降低，這

8、提示該化合物可能通過作用于細胞線粒體引起腫瘤細胞凋亡。通過Western blot檢測Bcl-2家族部分成員的蛋白表達水平，結果發(fā)現DHB可以誘導促凋亡蛋白Bax的表達增加，抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL表達的減少，細胞色素c釋放，凋亡執(zhí)行蛋白Caspase-3激活，從而啟動細胞凋亡。此外，我們采用細胞實時檢測系統(tǒng)，檢測了DHB與順鉑(cisplatin)聯(lián)用對A549細胞增殖的影響，結果表明，DHB在幾乎不影響細胞生長的低毒性濃度