大火草根化學成分及生物活性研究.pdf

1、大火草(Anemonetomentosa(Maxim.)Pei)系毛茛科(Ranunculaceae)銀蓮花屬(Anemone)多年生草本植物。大火草根供藥用，具有清熱解毒、排膿生肌、消腫散瘀、消食化積、截瘧、殺蟲等功效。廣布于我國西南，西北，華北及華中等地。為更好地開發(fā)和利用我國大火草植物資源及藥用價值，本文對甘肅產(chǎn)大火草根的化學成分和生物學活性進行了研究。
　　 對甘肅產(chǎn)大火草根化學成分進行了預實驗，其中檢出含黃酮類(二氫黃

2、酮)、香豆素、內(nèi)酯、強心甙、蒽醌及其甙類，皂苷(三萜皂苷)、糖及其苷、有機酸和酚類化合物；不含有生物堿、揮發(fā)性成分、氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)類化合物。
　　 對大火草根總黃酮、總皂苷和總多糖三類化學成分分別進行了生物學活性篩選試驗：(1)以濾紙圓片法對2種供試菌株(金黃色葡萄球菌、大腸桿菌)抑制活性作以研究，結果表明：大火草根總黃酮、總皂苷及總多糖對2種供試菌均無明顯抑制作用。(2)以MTT法對人肝癌細胞Hep-G2的抑制作用作以研

3、究，結果表明：大火草根總黃酮對人肝癌細胞Hep-G2有明顯抑制作用，總皂苷和總多糖對人肝癌細胞Hep-G2的抑制效果均不顯著。(3)以Vc為對照，對羥自由基和超氧陰離子自由基的清除作用作以研究，結果表明：總黃酮、總皂苷和總多糖與Vc比較具有較強的抗氧化能力，均呈明顯劑量效應關系。其中，總黃酮對羥自由基的清除作用比Vc強，對超氧陰離子的清除作用較Vc弱；與總黃酮、總皂苷和Vc比較，總多糖抗氧化活性最弱。
　　 鑒于大火草根總黃酮、

4、總皂苷及總多糖具有良好的抗腫瘤和抗氧化活性，本文采用單因素和正交實驗法，分別以總黃酮、總皂苷和總多糖的提取率為考察指標，對其提取工藝分別進行了優(yōu)選，實驗結果表明，總黃酮提取最佳工藝：乙醇濃度為60％，提取時間為80min，料液比為1:50,提取次數(shù)為3次，超聲功率為90W；總皂苷提取最佳工藝：乙醇濃度為60％，水浴溫度為75℃，提取時間為210min，料液比為1:20；總多糖提取最佳工藝：提取時間為150min，料液比為1:30,提取次

5、數(shù)為3次，提取溫度為90℃。
　　 以MIT法檢測大火草根總黃酮對人肝癌細胞Hep-G2和SMMC-7721、人乳腺癌細胞MCF-7及人宮頸癌細胞Hela的生長抑制情況，結果表明：大火草根總黃酮對以上腫瘤細胞均有明顯的抑制作用。在終濃度為1mg/mL時，對人肝癌細胞Hep-G2和SMMC-7721、人乳腺癌細胞MCF-7及人宮頸癌細胞Hela的抑制率均大于50%，細胞抑制活性均有明顯的劑量依賴關系，IC50分別為0.5298mg

6、/mL、0.2047mg/mL、0.2877mg/mL和0.2738mg/mL。在體內(nèi)，以移植性H22荷瘤小鼠為模型，大火草根總黃酮濃度為2.0g/kg、0.1g/kg、0.05g/kg時有不同程度的抑瘤作用，抑瘤率分別為38.57%、19.54%和13.92%，同樣也表現(xiàn)出了一定的劑量依賴性。通過比較胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)發(fā)現(xiàn)，大火草根總黃酮對荷瘤小鼠的免疫功能具有抑制作用，降低了脾臟的免疫能力。
　　 本文通過對大火草化學成分的