大火草根化學(xué)成分及生物活性研究.pdf

1、大火草(Anemonetomentosa(Maxim.)Pei)系毛茛科(Ranunculaceae)銀蓮花屬(Anemone)多年生草本植物。大火草根供藥用，具有清熱解毒、排膿生肌、消腫散瘀、消食化積、截瘧、殺蟲等功效。廣布于我國西南，西北，華北及華中等地。為更好地開發(fā)和利用我國大火草植物資源及藥用價(jià)值，本文對(duì)甘肅產(chǎn)大火草根的化學(xué)成分和生物學(xué)活性進(jìn)行了研究。
　　 對(duì)甘肅產(chǎn)大火草根化學(xué)成分進(jìn)行了預(yù)實(shí)驗(yàn)，其中檢出含黃酮類(二氫黃

2、酮)、香豆素、內(nèi)酯、強(qiáng)心甙、蒽醌及其甙類，皂苷(三萜皂苷)、糖及其苷、有機(jī)酸和酚類化合物；不含有生物堿、揮發(fā)性成分、氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)類化合物。
　　 對(duì)大火草根總黃酮、總皂苷和總多糖三類化學(xué)成分分別進(jìn)行了生物學(xué)活性篩選試驗(yàn)：(1)以濾紙圓片法對(duì)2種供試菌株(金黃色葡萄球菌、大腸桿菌)抑制活性作以研究，結(jié)果表明：大火草根總黃酮、總皂苷及總多糖對(duì)2種供試菌均無明顯抑制作用。(2)以MTT法對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep-G2的抑制作用作以研

3、究，結(jié)果表明：大火草根總黃酮對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep-G2有明顯抑制作用，總皂苷和總多糖對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep-G2的抑制效果均不顯著。(3)以Vc為對(duì)照，對(duì)羥自由基和超氧陰離子自由基的清除作用作以研究，結(jié)果表明：總黃酮、總皂苷和總多糖與Vc比較具有較強(qiáng)的抗氧化能力，均呈明顯劑量效應(yīng)關(guān)系。其中，總黃酮對(duì)羥自由基的清除作用比Vc強(qiáng)，對(duì)超氧陰離子的清除作用較Vc弱；與總黃酮、總皂苷和Vc比較，總多糖抗氧化活性最弱。
　　 鑒于大火草根總黃酮、

4、總皂苷及總多糖具有良好的抗腫瘤和抗氧化活性，本文采用單因素和正交實(shí)驗(yàn)法，分別以總黃酮、總皂苷和總多糖的提取率為考察指標(biāo)，對(duì)其提取工藝分別進(jìn)行了優(yōu)選，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，總黃酮提取最佳工藝：乙醇濃度為60％，提取時(shí)間為80min，料液比為1:50,提取次數(shù)為3次，超聲功率為90W；總皂苷提取最佳工藝：乙醇濃度為60％，水浴溫度為75℃，提取時(shí)間為210min，料液比為1:20；總多糖提取最佳工藝：提取時(shí)間為150min，料液比為1:30,提取次

5、數(shù)為3次，提取溫度為90℃。
　　 以MIT法檢測(cè)大火草根總黃酮對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep-G2和SMMC-7721、人乳腺癌細(xì)胞MCF-7及人宮頸癌細(xì)胞Hela的生長抑制情況，結(jié)果表明：大火草根總黃酮對(duì)以上腫瘤細(xì)胞均有明顯的抑制作用。在終濃度為1mg/mL時(shí)，對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep-G2和SMMC-7721、人乳腺癌細(xì)胞MCF-7及人宮頸癌細(xì)胞Hela的抑制率均大于50%，細(xì)胞抑制活性均有明顯的劑量依賴關(guān)系，IC50分別為0.5298mg

6、/mL、0.2047mg/mL、0.2877mg/mL和0.2738mg/mL。在體內(nèi)，以移植性H22荷瘤小鼠為模型，大火草根總黃酮濃度為2.0g/kg、0.1g/kg、0.05g/kg時(shí)有不同程度的抑瘤作用，抑瘤率分別為38.57%、19.54%和13.92%，同樣也表現(xiàn)出了一定的劑量依賴性。通過比較胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)發(fā)現(xiàn)，大火草根總黃酮對(duì)荷瘤小鼠的免疫功能具有抑制作用，降低了脾臟的免疫能力。
　　 本文通過對(duì)大火草化學(xué)成分的