ANXA2和ANXA4在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、背景：人體甲狀腺是由大約300萬個直徑為15~500μm的大小不一的濾泡構(gòu)成的人體最大的內(nèi)分泌腺，它分泌的甲狀腺激素由濾泡上皮細(xì)胞合成并以膠質(zhì)的形式儲存在濾泡腔內(nèi)，是人體內(nèi)唯一一個將產(chǎn)物儲存于細(xì)胞外的內(nèi)分泌腺。甲狀腺激素不僅可以促進(jìn)人體的生長發(fā)育，而且在調(diào)節(jié)人體能量代謝和三大物質(zhì)代謝方面具有重要意義，同時也影響人體器官系統(tǒng)的功能。甲狀腺癌作為世界范圍內(nèi)發(fā)病率上升最為迅速的實體惡性腫瘤，約占全部惡性腫瘤的1.5％。進(jìn)入21世紀(jì)以來，發(fā)病人

2、群數(shù)量驟升，目前甲狀腺癌發(fā)病率已躍居我國女性惡性腫瘤的第四位，在韓國位居第一位。作為最常見的、預(yù)后最好的甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid carcinoma，PTC），其發(fā)病的分子生物學(xué)機制至今仍未明確。人類膜聯(lián)蛋白家族（Annexins)是一類只有在鈣離子存在的條件下才能發(fā)揮生物學(xué)功能的磷脂結(jié)合蛋白，不僅參與離子通道的構(gòu)建、生物膜的生成及細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，而且在胞吞、胞吐與細(xì)胞增殖及凋亡等過程中起到一定作用，并且與細(xì)胞的

3、分化密切相關(guān)。膜聯(lián)蛋白 A2（AnnexinA2,ANXA2)和膜聯(lián)蛋白 A4（AnnexinA4,ANXA4)是家族中的兩個重要成員，其表達(dá)異常，與很多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。為研究ANXA2和ANXA4在甲狀腺腫瘤中的作用，本實驗采用免疫組化方法、反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、免疫印跡試驗(Western-Blot)檢測PTC、甲狀腺良性腫瘤、癌旁正常組織（作為對照組）中ANXA2和ANXA4 mRNA及其蛋白的表達(dá)情

4、況，并進(jìn)一步探討ANXA2與ANXA4表達(dá)與PTC患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系，以期為PTC的臨床診治奠定一定的理論基礎(chǔ)。
　　目的：檢測ANXA2與ANXA4在PTC、甲狀腺良性腫瘤、癌旁正常組織中的表達(dá)水平，并分析PTC患者臨床病理參數(shù)與ANXA2、ANXA4表達(dá)的相關(guān)性，然后探討這兩者在PTC中可能的作用機制。
　　方法：隨機抽取鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2014年6月至2015年4月經(jīng)病理科醫(yī)師證實的PTC新鮮組織78例，甲

5、狀腺良性腫瘤35例，癌旁正常組織20例（距離癌灶＞2cm），所選標(biāo)本為手術(shù)切除標(biāo)本，采用免疫組織化學(xué)方法、RT-PCR和Western-Blot檢測PTC、甲狀腺良性腫瘤、癌旁正常組織（對照組）中ANXA2、ANXA4蛋白及mRNA的表達(dá)水平，應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計軟件分析實驗獲得數(shù)據(jù)，并進(jìn)一步探討ANXA2、ANXA4在PT發(fā)展中的作用。
　　結(jié)果：ANXA2蛋白免疫組化結(jié)果:78例PTC患者中56例表達(dá)陽性（71.79%），

6、35例甲狀腺良性腫瘤中4例表達(dá)陽性（11.43%），20例癌旁正常組織中1例表達(dá)陽性（5.00%），三組進(jìn)行比較：χ2=51.29，P＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。RT-PCR結(jié)果：ANXA2 mRNA在PTC組、甲狀腺良性腫瘤、癌旁正常組織組中的相對表達(dá)量分別為0.578±0.197，0.151±0.046,0.112±0.034，三組進(jìn)行比較：F=137.66，P＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。Western-Blot結(jié)果：ANXA2

7、 mRNA在PTC組、甲狀腺良性腫瘤、癌旁正常組織中的相對表達(dá)量分別為0.762±0.133,0.233±0.109,0.217±0.084，三組進(jìn)行比較：F=221.66，P＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，ANXA2蛋白及mRNA表達(dá)與PTC的病理學(xué)T分期及N分期明顯相關(guān)(P<0.05)。ANXA4蛋白免疫組化結(jié)果:78例PTC患者中60例表達(dá)陽性（76.92%），35例甲狀腺良性腫瘤中3例表達(dá)陽性（8.57%），20例癌旁正常組織中2

8、例表達(dá)陽性（10.00%），三組進(jìn)行比較：χ2=59.41，P＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。RT-PCR結(jié)果：ANXA4 mRNA在PTC組、甲狀腺良性腫瘤、癌旁正常組織組中的相對表達(dá)量分別為0.641±0.154、0.266±0.082、0.188±0.034，三組進(jìn)行比較：F=167.15，P＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。Western-Blot結(jié)果：ANXA4蛋白在PTC組、甲狀腺良性腫瘤、癌旁正常組織組中的相對表達(dá)量分別為0.8