褐藻多糖硫酸酯對人黑色素瘤A357系細胞增殖與凋亡功能的影響研究.pdf

1、背景：黑色素瘤(melanoma)是常見的皮膚惡性腫瘤之一，其發(fā)病率在皮膚惡性腫瘤中為第三，死亡率為第一。針對黑色素瘤的治療方法較多，包括手術、放化療、免疫治療、個性化生物治療、個體靶向治療等。但這些治療方法仍存療效不高、副作用較大等問題。因此，研究新的有效的預防和治療黑色素瘤的藥物顯得十分的重要。褐藻多糖硫酸酯(fucoidan)是從褐藻或無脊椎動物中提取的，具有多種生物學活性，大量研究發(fā)現(xiàn)褐藻多糖硫酸酯對肺癌、結腸癌、乳腺癌、胃癌、

2、肝癌等多種腫瘤均有一定抗腫瘤治療作用。褐藻多糖硫酸酯不僅可以通過多種機制促進腫瘤細胞凋亡，還與某些藥物具有協(xié)同作用，能增加機體對化療藥物的敏感性及療效并減少其毒性。國外有學者在體外細胞實驗中發(fā)現(xiàn)褐藻多糖硫酸酯對黑色素瘤(B16)細胞有抑制增殖和促進凋亡的作用，目前國內尚無褐藻多糖硫酸酯對黑色素瘤細胞作用的研究。
　　目的：通過體外細胞實驗研究褐藻多糖硫酸酯對人惡性黑色素瘤A375系細胞增殖和凋亡的影響，以及凋亡相關蛋白Caspas

3、e-3的表達情況。為其應用于黑色素瘤的臨床治療提供實驗和理論依據(jù)。
　　方法：體外培養(yǎng)人黑色素瘤A375系細胞，用不同濃度褐藻多糖硫酸酯預處理細胞24h后，通過CCK8檢測細胞增殖并計算出細胞增殖抑制率，繪制量效曲線，得出其半數(shù)增殖抑制濃度(IC50)。通過AnnexinⅤ-FITC/PI雙標法流式細胞儀觀察其對細胞凋亡的影響;以蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測凋亡蛋白Caspase-3表達水平的變化，初步探討褐藻多

4、糖硫酸酯對人黑色素瘤細胞增殖和凋亡功能的影響。
　　結果：與空白對照組相比，CCK8檢測結果顯示褐藻多糖硫酸酯作用24h后，A375細胞的增殖抑制率隨藥物濃度的增加而增高，計算出其半數(shù)增殖抑制濃度為(IC50)0.51 mg/ml;流式細胞計數(shù)檢測細胞凋亡結果表明褐藻多糖硫酸酯作用后細胞的凋亡率明顯增高;Western blot的結果表明:隨著褐藻多糖硫酸酯濃度的增加，Caspase-3蛋白的表達水平增高。
　　結論：褐藻多