VMAT2基因聯(lián)合環(huán)境毒素對(duì)帕金森病非運(yùn)動(dòng)癥狀的作用研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過分別檢測(cè)正常對(duì)照（WT）組、WT+魚藤酮（Rotenone, Rot）組、Rot+VMAT2（+/-）組、VMAT2（+/-）組共四組C57BL/6小鼠糖水偏好試驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)等行為學(xué)改變，以及利用HPLC法檢測(cè)腦組織內(nèi)DA、5-HT、NE、DOPAC、HVA等神經(jīng)遞質(zhì)濃度變化，探討VMAT2基因?qū)ε两鹕⌒∈竽X紋狀體內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及非運(yùn)動(dòng)癥狀的影響，進(jìn)一步研究VMAT2基因聯(lián)合環(huán)境毒素對(duì)帕金森病非運(yùn)動(dòng)癥狀發(fā)揮作用的機(jī)制

2、。
　　方法:選取12月齡左右的C57BL/6雄性小鼠做為試驗(yàn)對(duì)象分為四組，第一組選取野生型（Wildtype, WT）C57BL/6小鼠作為正常對(duì)照組；第二組選用WT小鼠并用魚藤酮連續(xù)灌胃4個(gè)月制備PD動(dòng)物模型組；第三組使用出生時(shí)即敲低VMAT2基因50％的C57BL/6小鼠組；第四組選取VMAT2基因50%敲低小鼠使用連續(xù)魚藤酮灌胃處理4個(gè)月后的造模組。造模成功后，對(duì)各組小鼠進(jìn)行檢測(cè)抑郁程度的糖水偏好試驗(yàn)及懸尾實(shí)驗(yàn)。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)

3、結(jié)束后將各組動(dòng)物處死并快速取出腦組織，將取得的腦組織標(biāo)本處理后用高效液相色譜法(HPLC)分別測(cè)定腦組織中DA、DOPAC、HVA、5-HT、NE含量，并計(jì)算各組小鼠腦組織中DOPAC/DA比值的變化。應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析各組小鼠行為學(xué)及神經(jīng)遞質(zhì)含量各組之間的差異變化。
　　結(jié)果:糖水偏好實(shí)驗(yàn)：WT+Rot組、VMAT2（+/-）組、VMAT2（+/-）+Rot組糖水偏好度與WT組相比均有所降低，VMAT2（+/-）+Rot組糖水偏

4、好度與VMAT2（+/-）組相比也有所降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　懸尾實(shí)驗(yàn)：WT+Rot組、VMAT2（+/-）組、VMAT2（+/-）+Rot組懸尾不動(dòng)時(shí)間與WT組相比顯著延長(zhǎng)，VMAT2（+/-）+Rot組懸尾不動(dòng)時(shí)間與VMAT2（+/-）組相比也有所降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　HPLC:VMAT2（+/-）+Rot組、VMAT2（+/-）組、WT+Rot組相比于WT組，DA、

5、5-HT、NE含量均明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。VMAT2（+/-）+Rot組相比于VMAT2（+/-）組，DA、5-HT、NE含量亦明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。
　　結(jié)論:1.魚藤酮造模PD組小鼠出現(xiàn)抑郁的癥狀，行為學(xué)及病理生理學(xué)均有明顯改變；提示：一定情況下，魚藤酮不僅能模擬帕金森病的運(yùn)動(dòng)癥狀，且能反應(yīng)非運(yùn)動(dòng)癥狀的變化。VMAT2基因敲低小鼠亦出現(xiàn)明顯抑郁的行為學(xué)及病理生理變化，說明VMAT