轉(zhuǎn)基因煙草表達(dá)西紅花CSzCD基因產(chǎn)生西紅花酸及化學(xué)合成的西紅花酸體外抗腫瘤作用研究.pdf_第1頁(yè)
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1、西紅花系鳶尾科多年生草本植物，是一種珍貴藥材，還用作天然香料、染料，用途廣泛。其藥用部位是柱頭，有效成分主要是西紅花素，西紅花酸，西紅花醛和西紅花苦素。為了擴(kuò)大西紅花中有效成分的來(lái)源和進(jìn)一步系統(tǒng)的了解西紅花酸對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用，本論文對(duì)西紅花中克隆的CSzCD基因進(jìn)行了轉(zhuǎn)化煙草的研究，期望通過(guò)轉(zhuǎn)基因煙草來(lái)建立獲得西紅花酸的生物反應(yīng)器；同時(shí)對(duì)化學(xué)合成的西紅花酸進(jìn)行了系統(tǒng)的抗腫瘤作用篩選研究。 1．為研究轉(zhuǎn)基因煙草中產(chǎn)生西紅花酸的

2、可行性，在本研究中，西紅花玉米黃素裂解酶(CSzCD)基因插入到pBI121載體的花椰菜花病毒(CaMV)35S啟動(dòng)子下游，通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)整合到煙草基因組中。通過(guò)Southern blotting分析得到21株轉(zhuǎn)基因煙草株系；對(duì)轉(zhuǎn)基因煙草葉片提取物進(jìn)行Western blotting分析和HPLC分析，結(jié)果顯示有CSzCD蛋白的表達(dá)和西紅花酸的產(chǎn)生，陰性對(duì)照中并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)西紅花酸的存在。 2．用體外細(xì)胞培養(yǎng)法研究化學(xué)合成的西紅花酸

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