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文檔簡介
1、西紅花系鳶尾科多年生草本植物,是一種珍貴藥材,還用作天然香料、染料,用途廣泛。其藥用部位是柱頭,有效成分主要是西紅花素,西紅花酸,西紅花醛和西紅花苦素。為了擴大西紅花中有效成分的來源和進一步系統(tǒng)的了解西紅花酸對腫瘤細胞的抑制作用,本論文對西紅花中克隆的CSzCD基因進行了轉(zhuǎn)化煙草的研究,期望通過轉(zhuǎn)基因煙草來建立獲得西紅花酸的生物反應器;同時對化學合成的西紅花酸進行了系統(tǒng)的抗腫瘤作用篩選研究。 1.為研究轉(zhuǎn)基因煙草中產(chǎn)生西紅花酸的
2、可行性,在本研究中,西紅花玉米黃素裂解酶(CSzCD)基因插入到pBI121載體的花椰菜花病毒(CaMV)35S啟動子下游,通過農(nóng)桿菌介導整合到煙草基因組中。通過Southern blotting分析得到21株轉(zhuǎn)基因煙草株系;對轉(zhuǎn)基因煙草葉片提取物進行Western blotting分析和HPLC分析,結(jié)果顯示有CSzCD蛋白的表達和西紅花酸的產(chǎn)生,陰性對照中并沒有發(fā)現(xiàn)西紅花酸的存在。 2.用體外細胞培養(yǎng)法研究化學合成的西紅花酸
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