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文檔簡(jiǎn)介
1、背景與目的:
免疫性血小板減少癥(ITP)是一種自身免疫介導(dǎo)的出血性疾病,常伴皮膚黏膜出血等臨床表現(xiàn)。ITP的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,至今尚不十分明確。目前已經(jīng)證實(shí)免疫紊亂在 ITP的發(fā)病中占十分重要地位。其中,促炎因子與抗炎因子的失衡是造成免疫失衡的重要原因,涉及多種細(xì)胞及細(xì)胞因子間的復(fù)雜調(diào)控。IL-37是新發(fā)現(xiàn)的一種天然抗炎因子,已成為近期的研究熱點(diǎn)。IL-37屬于IL-1家族,主要由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等產(chǎn)生。
2、正常狀態(tài)下, IL-37在人體的表達(dá)量極低。近期研究發(fā)現(xiàn)IL-37在自身免疫性疾病中,如強(qiáng)直性脊柱炎(AS),系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE),表達(dá)量明顯升高。然而有關(guān)IL-37在ITP患者中的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。此次研究分別檢測(cè)IL-37、IL-18、IL-18BP、IFN-γ和TGF-β等細(xì)胞因子在活動(dòng)性ITP患者,緩解的ITP患者及正常人中的蛋白和基因表達(dá),探討IL-37在ITP發(fā)病中的可能作用,IL-37對(duì)其他細(xì)胞因子表達(dá)的影響及可能機(jī)制。
3、
方法:
此項(xiàng)研究招募了20例活動(dòng)性ITP患者、20例緩解ITP患者以及20例正常人,分別抽取空腹外周血2ml。離心取上層血清,應(yīng)用 ELISA方法檢測(cè)血清中細(xì)胞因子 IL-37、IL-18、IL-18BP、IFN-γ及 TGF-β的濃度;余下細(xì)胞應(yīng)用Ficoll-Paque細(xì)胞分離的方法分離出外周血單個(gè)核細(xì)胞,然后提取RNA,反轉(zhuǎn)錄后應(yīng)用Real-time PCR檢測(cè)IL-37、IL-18、IL-18BP、IFN-
4、γ及TGF-β的mRNA表達(dá)。
結(jié)果:
1.細(xì)胞因子在血清中的表達(dá)
與正常人相比,活動(dòng)性 ITP患者血清中 IL-37、IL-18和 IFN-γ均顯著升高(P<0.05),而TGF-β水平明顯降低(P<0.05)。緩解ITP患者的TGF-β的血清水平較正常人也明顯降低(P<0.05),而IL-37、IL-18、和IFN-γ的血清水平接近正常水平(P>0.05)?;顒?dòng)性 ITP患者的血清中 IL-18BP略高
5、于正常對(duì)照組,但是三組中的蛋白表達(dá)無(wú)明顯差異(P>0.05)。
2.細(xì)胞因子的mRNA表達(dá)
活動(dòng)性 ITP患者 IL-37、IL-18、IFN-γ的 mRNA表達(dá)量均顯著高于緩解組(P<0.05)和對(duì)照組(P<0.05),與之相反,TGF-β的 mRNA表達(dá)顯著低于緩解組(P<0.05)和對(duì)照組(P<0.05)。緩解ITP患者的IL-37、IL-18、IFN-γ和TGF-β的血清水平較正常人無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.
6、05)?;顒?dòng)性ITP患者的IL-18BP mRNA表達(dá)量略高于正常對(duì)照組,但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
3.細(xì)胞因子間的相關(guān)性
活動(dòng)性ITP患者中,IL-37的mRNA表達(dá)與IL-18BP(R=0.840,P=0.001), IFN-γ(R=0.670,P=0.029)顯著正相關(guān),而與IL-18、TGF-β無(wú)明顯相關(guān)性。
結(jié)論:
1.正常人的IL-37表達(dá)量很低,活動(dòng)性ITP患者的IL-37
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