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文檔簡介
1、實驗目的:研究白細胞介素37對人THP-1源巨噬細胞泡沫化過程中清道夫受體SRA、CD36和脂質逆向轉運蛋白ABCA-1表達的影響,探討IL-37對oxLDL誘導巨噬細胞泡沫化的干預作用及機制。
實驗方法:體外培養(yǎng)THP-1,用佛波酯(PMA)刺激24h使其分化為巨噬細胞后;1)用IL-37和/或oxLDL刺激THP-1源巨噬細胞24小時;2)用不同濃度的IL-37和oxLDL同時刺激24小時;3)用oxLDL刺激THP-1源
2、的巨噬細胞24h,再加IL-37干預24h,收集細胞。采用油紅染色觀察各組泡沫細胞所占細胞總數的比例,TC試劑盒測定細胞內總膽固醇的含量,利用RT-PCR、westernblot實驗方法從mRNA水平和蛋白水平測定泡沫細胞清道夫受體CD36和SRA和ABCA-1的表達。
實驗結果:與對照組比較,IL-37能夠減少泡沫細胞的形成,降低泡沫細胞總膽固醇的聚集(TC:150.4±7.36vs.303.1±8.9ng/mg,p<0.0
3、1);顯著抑制巨噬細胞清道夫受體CD36和SRA的表達,而顯著增強ABCA-1的表達,且作用與溶度正相關。對oxLDL誘導的泡沫細胞,給予IL-37后仍能夠上調ABCA1的表達,下調SRA、CD36的表達。
實驗結論:IL-37通過抑制清道夫受體CD36和SRA的表達以及促進膽固醇逆向轉運蛋白ABCA-1的表達,減少巨噬細胞脂質的攝取,增強逆向轉運,減輕THP-1源泡沫細胞的形成;對于oxLDL誘導形成的泡沫細胞,IL-37仍
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