人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)與人——牛卵母細(xì)胞異質(zhì)克隆胚構(gòu)建.pdf

1、本研究在37C、5％的CO<,2>、飽和濕度下采用組織塊體外培養(yǎng)法建立人胎兒皮膚成纖維細(xì)胞系，繪制TF8、F12和F44代細(xì)胞生長曲線，并對(duì)F8、F12及F44代細(xì)胞進(jìn)行核型分析，發(fā)現(xiàn)86.9％、84.3％和77.8％的細(xì)胞染色體核型保持正常的倍數(shù)(2n=46)。對(duì)比了培養(yǎng)液不同pH值對(duì)成纖維細(xì)胞生長狀況的影響(取左耳邊緣第四代細(xì)胞)，當(dāng)pH值為6.8-7.0時(shí)，細(xì)胞貼壁率為92.20％；當(dāng)pH值為7.O-7.2時(shí)，細(xì)胞貼壁率為79.3

2、％，說明pH值對(duì)成纖維細(xì)胞生長狀況的影響顯著(P<0.05)。對(duì)比了第四代不同部位(背部2塊、肋部2塊及雙耳邊緣)成纖維細(xì)胞生長狀況，發(fā)現(xiàn)不同部位成纖維細(xì)胞生長狀況差異不顯著(P>0.05)。 對(duì)比了不同采集方法，不同體積培養(yǎng)液，不同水質(zhì)對(duì)牛卵母細(xì)胞經(jīng)體外成熟培養(yǎng)后的成熟率及孤雌激活囊胚率，發(fā)現(xiàn)不同采集方法與不同體積培養(yǎng)液均無顯著影響(P>0.05)，兩種不同水質(zhì)對(duì)牛卵巢卵母細(xì)胞成熟率和卵裂率無顯著影響(P>0.05)，但對(duì)孤雌