成年皮膚成纖維細胞克隆綿羊的生產(chǎn).pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本實驗通過不同激活方法對綿羊體外成熟卵母細胞孤雌激活胚胎早期發(fā)育效果進行了比較分析，為綿羊體細胞核移植后重構(gòu)胚的激活奠定了一定的基礎(chǔ)；比較了不同融合電壓對重構(gòu)胚發(fā)育的影響；比較了不同胚齡重構(gòu)胚的胚胎移植對產(chǎn)羔率的影響。 在37℃、5％CO2、飽和濕度下，采用10％FBS的DMEM/F12培養(yǎng)液和組織塊直接培養(yǎng)法培養(yǎng)綿羊皮膚成纖維細胞，有效的建立了綿羊皮膚成纖維細胞系。通過生長曲線測定和染色體計數(shù)可確定分離培養(yǎng)的綿羊皮膚成纖維細胞

2、基本符合體外培養(yǎng)細胞生長特性。 電激活和化學(xué)激活方法都可有效激活綿羊卵母細胞，但離子霉素聯(lián)合6—DMAP激活綿羊卵母細胞的卵裂率和桑椹＼囊胚率為78.90％和41.95％，優(yōu)于7％乙醇聯(lián)合6—DMAP的卵裂率75.47％和桑椹＼囊胚率37.11％；顯著高于電激活的卵裂率57.68％和桑椹＼囊胚率18.31％。 對處于不同胚齡的克隆胚采用手術(shù)法進行胚胎移植，融合胚、2-16cell胚、桑囊胚的妊娠率分別為14.4％、0、3

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