GATA2與Smad4相互作用負(fù)調(diào)控TGFβ信號(hào)通路.pdf

1、GATA2是轉(zhuǎn)錄因子GATA家族成員，在造血干細(xì)胞/祖細(xì)胞中高表達(dá)，對(duì)造血干細(xì)胞的自我更新與分化具有重要調(diào)控作用。TGFβ信號(hào)通路是參與細(xì)胞增殖、分化、及腫瘤生成等多種生理病理學(xué)過(guò)程的重要信號(hào)通路。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)TGFβ信號(hào)的下調(diào)在造血干細(xì)胞的自我更新過(guò)程發(fā)揮關(guān)鍵作用。本實(shí)驗(yàn)室前期利用大規(guī)模酵母雙雜交篩選造血干細(xì)胞蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)，獲得GATA2的高可信度相互作用蛋白質(zhì)Smad4。Smad4是TGFβ信號(hào)通路的重要成員，可與其他Sma

2、d蛋白形成復(fù)合體調(diào)控下游靶基因的表達(dá)。
　　 本研究利用免疫共沉淀、GST-pulldown及共定位實(shí)驗(yàn)證實(shí)GATA2與Smad4存在相互作用。利用報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)證實(shí)GATA2能夠特異地抑制Smad4及TGFβ誘導(dǎo)的信號(hào)通路活化，并進(jìn)而抑制TGFβ下游靶基因PAI-1的表達(dá)，這種抑制作用需要GATA2蛋白質(zhì)的全長(zhǎng)。對(duì)GATA2抑制作用的分子進(jìn)行研究表明GATA2對(duì)Smad4的DNA結(jié)合活性無(wú)明顯影響。此外，雖然GATA2可募集HD