NIRF與P53相互作用研究.pdf

1、本研究主要采用immunoprecipitation(IP)，GST-pulldown，體外泛素化和蛋白結(jié)構(gòu)生物信息學(xué)等為主要技術(shù)，研究了新發(fā)現(xiàn)的核蛋白Np95一likeringfingerprotein(NmF)與P53蛋白的相互關(guān)系，結(jié)果表明：1．NIRF不僅能與轉(zhuǎn)染的外源性P53蛋白相互結(jié)合，也能與細(xì)胞核編碼的內(nèi)源性P53蛋白在細(xì)胞內(nèi)相互結(jié)合，在細(xì)胞內(nèi)與NIRF結(jié)合的P53蛋白被NIRF泛素化。2．NIRF蛋白與P53蛋白在細(xì)胞外

2、也能相互結(jié)合。3．細(xì)胞外泛素化實(shí)驗(yàn)表明，在NIRF的存在下，P53蛋白被泛素化。4．NIRF蛋白的結(jié)構(gòu)生物信息學(xué)分析表明，其磷酸化位點(diǎn)應(yīng)該是Ser／Thr磷酸化性質(zhì)；NIRF作為具有泛素化能力的結(jié)構(gòu)域是在其C一端的RINGfinger結(jié)構(gòu)。其結(jié)構(gòu)中的2個Zn2+在泛素化過程中具有不同的作用。 NIRF與P53蛋白的結(jié)合與泛素化表明，NIRF在細(xì)胞可能是P53蛋白的一個負(fù)調(diào)節(jié)因子之一，已知P53蛋白在細(xì)胞中的功能主要表現(xiàn)在阻滯細(xì)