β1，4半乳糖基轉移酶Ⅰ和Ⅴ在腫瘤和凋亡中的作用研究.pdf

1、蛋白的糖基化修飾是一個生物體內復雜而又重要的過程，它和腫瘤的發(fā)生發(fā)展、侵襲和轉移等密切相關。蛋白質的糖基化修飾是在內質網-高爾基體內由糖基轉移酶參與下完成的。β1,4-半乳糖基轉移酶(β1,4-galactosyl transferase)(簡稱β1，4GT)家族包括β1，4GI、I到β1，4GT Ⅶ共7個成員，能定位于高爾基體催化Galβ1→4G1cNAC糖苷鍵形成，參與糖復合物的合成。β1,4-半乳糖基轉移酶Ⅰ(簡稱β1，4GT Ⅰ

2、)是最早被克隆的一種糖基轉移酶。β1，4GT Ⅰ既能定位于高爾基體催化Galβ1→4G1cNAC糖苷鍵形成，參與糖復合物的合成；又能定位于細胞表面，作為一種細胞粘附分子參與細胞與基質之間和細胞與細胞之間的相互作用。 我們的研究發(fā)現(xiàn)：myr-Akt通過下調β1，4GT Ⅰ的表達從而抑制CHX介導的SMMC-7721細胞的凋亡。而渥曼青霉素和LY294002處理可以增加Spl的轉錄表達進而促進β1，4GT Ⅰ的表達，從而增強了CHX

3、所介導的SMMC-7721細胞凋亡。另外，我們發(fā)現(xiàn)CHX下調Akt蛋白表達從而導致β1，4GT Ⅰ的表達上調來增加SMMC-7721細胞的凋亡。 我們另一個部分的研究結果表明：β1，4GT Ⅰ在肝癌組織和肝癌細胞中高表達。β1，4GT Ⅰ的表達受肝癌相關因素黃曲霉素、佛波酯、乙肝病毒HBX蛋白和p53蛋白調控，并且β1，4GT Ⅰ的表達和肝癌細胞的成瘤能力、侵襲、轉移以及侵襲相關的Integrin β1的表達和FAK的磷酸化相關

4、。報告基因和凝膠阻滯試驗證實：E2F1調控β1，4GT Ⅰ轉錄而調節(jié)其在肝癌中的生物學功能。 β1，4GI Ⅴ負責合成膠質瘤特征的N-連接型糖鏈末端GlcNAc β1，6Man的半乳糖基化修飾。國外研究發(fā)現(xiàn)，β1，4GT Ⅴ在多種腫瘤細胞中受Spl調控。我們的研究發(fā)現(xiàn)，β1，4GT Ⅴ在膠質瘤表達增高并和膠質瘤的分型相關。過表達β1，4GTⅤ可促進膠質瘤細胞和轉化星型膠質細胞的侵襲和生存。抑制其表達可促進凋亡、抑制遷移侵襲以及在

5、裸鼠體內的成瘤能力和抑制AKI、的磷酸化活性。另外，其啟動子活性可被生長因子EGF、激活型Ras、ERK1、JNK1和激活型AKT激活。鬼臼乙叉甙(VP16)，是植物產物鬼臼毒素的一種半合成派生物，它可以對許多人類新生物產生臨床作用，用于小細胞肺癌、惡性淋巴癌、卵巢癌、睪丸腫瘤、胃癌和膠質瘤的治療。我們發(fā)現(xiàn)：抑制β1，4GI、Ⅴ的表達促進VP16誘導的膠質瘤細胞凋亡。過表達β1，4GT Ⅴ抑制VP16誘導的膠質瘤細胞凋亡。VP16可通過

6、抑制Spl的表達下調β1，4GT Ⅴ的表達和轉錄。從上可見，β1，4GT Ⅴ可促進膠質瘤的發(fā)生發(fā)展并且可能可作為膠質瘤治療新的靶向。β1，4GT Ⅴ在膠質瘤組織、細胞高表達并受EGF/Ras/ERK信號通路調控。我們的研究證實：E1AF調控β1，4GT Ⅴ在膠質瘤細胞中的轉錄和介導EGF/Ras/ERK信號通路對β1，4GT Ⅴ的轉錄調控。過表達E1AF促進β1，4GT Ⅴ的轉錄表達和膠質瘤細胞的侵襲。抑制E1AF的表達抑制膠質瘤細胞的