IRF-7對草魚(Ctenopharyngodon idella)Ⅰ型干擾素轉錄的調(diào)控.pdf

1、干擾素(IFN)是一種具有抗病毒,抗腫瘤以及調(diào)節(jié)自身免疫等多種功能的糖蛋白。干擾素調(diào)節(jié)因子(IRF)因對干擾素具有轉錄調(diào)控功能而得名。干擾素調(diào)節(jié)因子1、5、7在調(diào)控干擾素以及干擾素刺激基因(ISGs)轉錄方面扮演著重要作用。在哺乳類動物中有關IRF調(diào)控機理的研究已有很多,但在魚類中有關他們研究還比較少。草魚是我國重要的經(jīng)濟魚種,本文主要研究了草魚IRF-7對Ⅰ型干擾素的調(diào)控機制。
　　 在實驗室已克隆1個草魚Ⅰ型干擾素基因組及其

2、啟動子序列的基礎上,我們對其序列特征進行了分析,發(fā)現(xiàn)草魚Ⅰ型干擾素基因啟動子包含啟動子也包含一個典型的TATA box,4個IRF-E結合位點,兩個NF-κB位點以及一個ATF-2/c-Jun結合位點。根據(jù)其啟動子的結構特征,我們克隆了含有不同結合位點的CiIFN啟動子片段CiIFNP1-P9。同時,在克隆草魚IRF-7的基礎上,分析了CiIRF-7在草魚肝,脾,腎中的表達水平,發(fā)現(xiàn)CiIRF-7經(jīng)poly I:C誘導之后表達水平上調(diào)。

3、并且通過原核表達系統(tǒng)獲得草魚IRF-7DBD結構域蛋白。通過凝膠阻滯分析得出草魚IRF-7能夠在體外與IFN各個啟動子片段結合,為證明它們對IFN的調(diào)控作用提供了可靠的證據(jù)。我們還利用共轉染實驗技術,將CiIRF-7和IFN啟動子片段分別轉染至小鼠骨髓瘤細胞和草魚腎細胞,結果表明CiIRF-7能夠誘導上調(diào)CiIFN啟動子,揭示了草魚IRF-7對Ⅰ型干擾素的正調(diào)控作用。
　　 本文同時檢測了CiIRF-1在草魚各組織的表達水平,結