草魚(yú)干擾素調(diào)節(jié)因子（IRF）和Mx蛋白基因的克隆與表達(dá).pdf

1、上海水產(chǎn)大學(xué)碩士學(xué)位論文草魚(yú)干擾素調(diào)節(jié)因子（IRF）和Mx蛋白基因的克隆與表達(dá)姓名：王偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖指導(dǎo)教師：羅建仁白俊杰2003.5.6上海水產(chǎn)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要的T載體上。重組子的序列分析表明：所克隆的№蛋白eDNA長(zhǎng)722bp，編碼240個(gè)氨基酸，包括一個(gè)三聯(lián)GTP結(jié)合區(qū)域和一個(gè)發(fā)動(dòng)蛋白(dynamin)族特征的序列。與已知魚(yú)類Mx蛋白基因序列比較表明，草魚(yú)Mx蛋白基因序列與其它魚(yú)類№基因相應(yīng)序列具有較高的同

2、源性，其中與斑馬魚(yú)Mx蛋白E型基因堿基和氨基酸序列比較同源性最高，均為871％。將此基因改造后定向克隆至原核表達(dá)質(zhì)粒pBV220，構(gòu)建成重組草魚(yú)Mx蛋白基因表達(dá)質(zhì)粒pBVgcMx，并在大腸桿菌中獲高效表達(dá)，重組草魚(yú)Mx蛋白的表達(dá)量占菌體總蛋白的266％。QXL陰離子交換層析柱分離純化的重組草魚(yú)Mx蛋白，純度達(dá)956％。此重組蛋白可以用來(lái)制備魚(yú)類Mx蛋白抗血清，制備的抗血清希望能夠用來(lái)檢測(cè)不同種類魚(yú)的№蛋白，進(jìn)而檢測(cè)魚(yú)類干擾素產(chǎn)生情況，為