斑馬魚nr1d4a和nr1d4b基因的表達(dá)及其對(duì)不同環(huán)境刺激的響應(yīng).pdf

1、細(xì)胞核受體家族成員可作為轉(zhuǎn)錄因子參與多種重要生物學(xué)過程的調(diào)控。前期研究發(fā)現(xiàn),斑馬魚nr1d4a和nr1d4b都是能被低溫刺激顯著誘導(dǎo)的即刻早期基因,但尚不清楚其表達(dá)模式以及對(duì)其它環(huán)境刺激的轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。本研究獲得了斑馬魚nr1d4a和nr1d4b基因的cDNA,進(jìn)行了序列比對(duì)和系統(tǒng)進(jìn)化分析,并采用實(shí)時(shí)定量RT-PCR(qPCR)方法研究了其表達(dá)模式及對(duì)不同環(huán)境刺激的轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn),斑馬魚nr1d4a和nr1d4b是由基因復(fù)制產(chǎn)生的旁系同

2、源基因,具有高度保守的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域。斑馬魚nr1d4a和nr1d4b的表達(dá)模式具有明顯的差別。nr1d4a在胚胎發(fā)育早期的表達(dá)量很低,72hpf時(shí)開始顯著升高;而nr1d4b具有較高水平的母源性表達(dá),6hpf時(shí)的表達(dá)量明顯降低,但也在72hpf顯著回升。nr1d4a在腦和腎臟中表達(dá)量最高,其次是鰓、卵巢、精巢和眼,在肝臟中的表達(dá)量最低;nr1d4b在卵巢中表達(dá)量最高,其次是精巢和腦,在腸道和心臟中表達(dá)量最低。斑馬魚n

3、r1d4a和nr1d4b都能被多種環(huán)境刺激瞬時(shí)誘導(dǎo)表達(dá)。16℃低溫處理0.5h就能顯著誘導(dǎo)斑馬魚nr1d4a和nr1d4b基因的表達(dá),但處理6h后其誘導(dǎo)效應(yīng)開始下降并逐漸消失。除低溫外,重金屬(2μM鎘)、高溫(34℃)、缺氧(5％氧氣)和鹽度(5‰)處理均能瞬時(shí)誘導(dǎo)nr1d4a和nr1d4b的表達(dá),說明nr1d4a和nr1d4b基因可能參與斑馬魚對(duì)多種環(huán)境刺激的適應(yīng)性反應(yīng)。本研究為深入揭示魚類nr1d4a和nr1d4b基因的生物學(xué)功能