杜鵑素初步藥物動(dòng)力學(xué)及其抑制球囊損傷致大鼠頸總動(dòng)脈內(nèi)膜增生作用研究.pdf

1、目的：
　　對(duì)天然產(chǎn)物二氫黃酮類化合物杜鵑素進(jìn)行體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)初步研究，以確定給藥方式；進(jìn)而采用SD大鼠頸總動(dòng)脈內(nèi)膜增生模型、研究其內(nèi)膜增生抑制作用及初步機(jī)制，為杜鵑素“老藥新用”提供數(shù)據(jù)支持和理論依據(jù)。
　　方法：
　　（1）HPLC法檢測(cè)單次經(jīng)尾靜脈給藥（36mg/kg和18mg/kg）后，不同時(shí)間點(diǎn)杜鵑素在血漿及組織勻漿中的濃度，并采用DAS軟件分析主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，初步評(píng)價(jià)杜鵑素在體內(nèi)的分布代謝情況。（2）采

2、用球囊損傷方式建立SD大鼠頸總動(dòng)脈內(nèi)膜增生模型，采取杜鵑素-25％pluronic F-127混合凝膠在損傷血管周圍給藥的方式，于術(shù)后特定時(shí)間取頸總動(dòng)脈損傷部位血管段，并經(jīng)腹主動(dòng)脈采血；HE染色法評(píng)價(jià)血管內(nèi)膜增生情況；免疫組化法考察損傷血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)表型轉(zhuǎn)換相關(guān)蛋白(OPN、PCNA、α-SMA、transgelin-2(c-12))的表達(dá)情況；Elisa法檢測(cè)血清中IL-1β、IL-6、PDGF和TNF-α等生化指標(biāo)的變

3、化情況。
　　結(jié)果：
　?。?）杜鵑素單次尾靜脈給藥的統(tǒng)計(jì)矩參數(shù) AUC(0-∞)分別為：2.311±0.778(18mg/kg)、10.705±1.081(36mg/kg) mg/L×h；t1/2分別為：0.211±0.04 h(18mg/kg)、0.097±0.023 h(36mg/kg)。大鼠單次高劑量靜脈注射杜鵑素后肺部含量最高，其次是肝、腎、心等組織。（2）HE染色結(jié)果顯示，大鼠球囊損傷血管7天后管腔顯著狹窄，內(nèi)膜

4、/中膜增加；血清中IL-6、TNF-α和PDGF在2天后增高，7天后達(dá)峰值， IL-1β在血清中時(shí)間依賴性的呈現(xiàn)降低趨勢(shì)；杜鵑素干預(yù)組結(jié)果顯示給藥7天后，血管管腔狹窄程度和血清中炎癥因子(IL-6、TNF-α)、增殖相關(guān)因子(PDGF)的含量顯著低于模型組，血管壁 PCNA和OPN的表達(dá)顯著低于模型組，而α-SMA和transgelin-2(c-12)表達(dá)顯著高于模型組。
　　結(jié)論：
　?。?）本文建立的HPLC法準(zhǔn)確、高效

5、、簡(jiǎn)便，可以用于測(cè)定大鼠血漿及組織勻漿中杜鵑素的含量，杜鵑素經(jīng)尾靜脈直接入血后，呈現(xiàn)快分布慢消除的特征，且迅速分布進(jìn)入到肺、肝、心等組織中。（2）本文成功建立大鼠球囊損傷致頸總動(dòng)脈內(nèi)膜增生模型，可滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)需求；杜鵑素可濃度依賴性抑制損傷血管內(nèi)膜增生、有效緩解管腔狹窄，可能是通過抑制炎癥因子(IL-6、TNF-α)、增殖相關(guān)因子(PDGF)在血液中的表達(dá)、抑制大鼠VSMCs表型轉(zhuǎn)換相關(guān)蛋白等途徑實(shí)現(xiàn)。本文為天然產(chǎn)物杜鵑素“老藥新用”提