內(nèi)源性大麻素受體2的激活介導(dǎo)Notch通路參與骨形成的研究.pdf

1、隨著人口壽命的逐漸延長(zhǎng)和老齡化趨勢(shì)的不斷上升，如何防治骨質(zhì)疏松癥，改善骨代謝已成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)界亟待解決的難題。我們的前期工作表明，內(nèi)源性大麻素受體CB2的激活可以使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中堿性磷酸酶活性增加，促進(jìn)成骨基因的表達(dá)，并促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)中的鈣沉積，從而促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化，然而作用機(jī)制尚不明確。近來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)Notch信號(hào)通路在骨形成過(guò)程中可以抑制骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化。本研究以CB2激動(dòng)劑為切入點(diǎn)進(jìn)一步探討CB2

2、是否通過(guò)Notch通路介導(dǎo)大鼠骨形成。
　　目的:CB2是否可以通過(guò)Notch通路介導(dǎo)大鼠成骨細(xì)胞分化。
　　方法:實(shí)驗(yàn)對(duì)象:3月齡，SPF級(jí)，雌性，SD大鼠（來(lái)自中國(guó)醫(yī)科大學(xué)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部門(mén)），體重:300～310g，隨機(jī)分為3組，對(duì)其中一組為對(duì)照組進(jìn)行假手術(shù)(shamoperation)處理，對(duì)另兩組實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行去除卵巢的手術(shù)（ovariectomy）。手術(shù)后12周，假手術(shù)組為正常對(duì)照組，去除卵巢雌鼠分成2組，分別是:去卵巢

3、組（不接受任何干預(yù)）、去卵巢+HU308組（HU308劑量0.2mg/kg/d）。采取美國(guó)GE公司雙能X線吸收儀(DXA)測(cè)量大鼠離體股骨骨密度，取右側(cè)股骨進(jìn)行生物力學(xué)試驗(yàn);分離左股骨不脫鈣進(jìn)行切片，并進(jìn)行HE染色分析;Western Blot法測(cè)定實(shí)驗(yàn)各組大鼠骨組織中Jagged-1與HES1蛋白表達(dá)。
　　實(shí)驗(yàn)所得的數(shù)據(jù)采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料的表示方法為均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差（x±s），組間比較采用單因素方差分

4、析，當(dāng)P＜0.05時(shí)認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:1、骨生物力學(xué)和骨密度:去卵巢+HU308組SD大鼠的骨密度、生物力學(xué)性能都顯著高于去卵巢組，但低于正常對(duì)照組。2、組織學(xué)觀察:去卵巢+HU308組骨小梁丟失較去卵巢組明顯減少，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。但低于正常對(duì)照組的骨小梁，二者比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3、蛋白表達(dá):與正常對(duì)照組相比，去卵巢組大鼠骨組織Jagged-1與HES1的表達(dá)顯著性升高(P＜0.05);去卵巢+HU308組的Jagg