調(diào)控內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)對(duì)不同腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的影響研究.pdf

1、研究背景:腦膠質(zhì)瘤是惡性度很高、易復(fù)發(fā)、預(yù)后差的顱內(nèi)惡性腫瘤之一，在臨床上一直是個(gè)難題。許多研究證明內(nèi)源性大麻素具有抗腫瘤生成作用，包括抑制增殖、誘導(dǎo)凋亡和抑制遷移作用，但其對(duì)膠質(zhì)瘤的作用靶點(diǎn)及詳細(xì)機(jī)制尚未完全闡明。雷公藤紅素可以抑制蛋白酶體活性、阻滯在細(xì)胞周期和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，這使得它成為一種潛在的治療膠質(zhì)瘤的藥物。
　　目的:本研究通過(guò)觀察利用單獨(dú)分子生物學(xué)、分子藥物學(xué)手段調(diào)控內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)或與雷公藤紅素聯(lián)用后不同膠質(zhì)瘤細(xì)胞的

2、增殖情況，在細(xì)胞水平探討膠質(zhì)瘤可能的治療靶點(diǎn)，為雷公藤紅素開發(fā)成為抗膠質(zhì)瘤新藥提供依據(jù)。
　　方法:用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算細(xì)胞數(shù)繪制細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，根據(jù)曲線計(jì)算出倍增時(shí)間;用Westernblot方法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)CD133表達(dá);內(nèi)源性大麻素、游離脂肪酸及神經(jīng)酰胺采用LC-MS/MS方法檢測(cè);使用熒光定量PCR(RT-qPCR)技術(shù)檢測(cè)大麻素受體CB1、CB2，大麻素水解酶FAAH、MGL等的基因mRNA表達(dá)水平及雷公藤紅素對(duì)其的影響;用C

3、CK-8試劑盒檢測(cè)單獨(dú)調(diào)控內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)或與雷公藤紅素聯(lián)用后膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響。
　　結(jié)果:SHG細(xì)胞增長(zhǎng)速度最快，具有干細(xì)胞特征。四種細(xì)胞內(nèi)FFAs、Ceramides含量均有顯著性差異。內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)中大麻素AEA、2-AG及其水解酶FAAH、MGL，以及CB1的表達(dá)有顯著性差異，2-AG和MGL是調(diào)控內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)的重要靶點(diǎn)。雷公藤紅素對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞具有一定程度的抑制作用，存在時(shí)間和劑量依賴性，在此過(guò)程中上調(diào)了大麻素受