調(diào)控內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)對不同腦膠質(zhì)瘤細胞的影響研究.pdf

1、研究背景:腦膠質(zhì)瘤是惡性度很高、易復(fù)發(fā)、預(yù)后差的顱內(nèi)惡性腫瘤之一，在臨床上一直是個難題。許多研究證明內(nèi)源性大麻素具有抗腫瘤生成作用，包括抑制增殖、誘導(dǎo)凋亡和抑制遷移作用，但其對膠質(zhì)瘤的作用靶點及詳細機制尚未完全闡明。雷公藤紅素可以抑制蛋白酶體活性、阻滯在細胞周期和誘導(dǎo)細胞凋亡，這使得它成為一種潛在的治療膠質(zhì)瘤的藥物。
　　目的:本研究通過觀察利用單獨分子生物學(xué)、分子藥物學(xué)手段調(diào)控內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)或與雷公藤紅素聯(lián)用后不同膠質(zhì)瘤細胞的

2、增殖情況，在細胞水平探討膠質(zhì)瘤可能的治療靶點，為雷公藤紅素開發(fā)成為抗膠質(zhì)瘤新藥提供依據(jù)。
　　方法:用細胞計數(shù)板計算細胞數(shù)繪制細胞的生長曲線，根據(jù)曲線計算出倍增時間;用Westernblot方法檢測細胞內(nèi)CD133表達;內(nèi)源性大麻素、游離脂肪酸及神經(jīng)酰胺采用LC-MS/MS方法檢測;使用熒光定量PCR(RT-qPCR)技術(shù)檢測大麻素受體CB1、CB2，大麻素水解酶FAAH、MGL等的基因mRNA表達水平及雷公藤紅素對其的影響;用C

3、CK-8試劑盒檢測單獨調(diào)控內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)或與雷公藤紅素聯(lián)用后膠質(zhì)瘤細胞增殖的影響。
　　結(jié)果:SHG細胞增長速度最快，具有干細胞特征。四種細胞內(nèi)FFAs、Ceramides含量均有顯著性差異。內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)中大麻素AEA、2-AG及其水解酶FAAH、MGL，以及CB1的表達有顯著性差異，2-AG和MGL是調(diào)控內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)的重要靶點。雷公藤紅素對膠質(zhì)瘤細胞具有一定程度的抑制作用，存在時間和劑量依賴性，在此過程中上調(diào)了大麻素受