綠色木霉的內切葡聚糖苷酶基因的克隆與遺傳轉化.pdf

1、資源和環(huán)境問題是現代社會發(fā)展所面臨的一個重要挑戰(zhàn)。目前地球上每年光合作用的產物高達數億噸，其中90％以上是纖維素類物質，但這部分資源卻沒有得到充分的開發(fā)利用。面臨全世界的糧食短缺、環(huán)境污染、能源危機等現實問題，將纖維素類物質轉化為可再生資源成為緩解這些問題的一個重要手段。而纖維素酶的分子生物學與基因工程的研究發(fā)展將會加快纖維素廣泛應用于工農業(yè)生產的進程，能切實提高纖維素的有效利用，通過利用纖維素酶將大量被浪費的纖維素資源轉變?yōu)槿祟惿钏?/p>

2、需要的各類物質，從根本上解決全世界的危機。
　　 對纖維素酶分子的研究，對于有效利用纖維素，解決纖維素浪費或污染，提供生物能源有很大的應用和實用前景。
　　 內切葡聚糖苷酶（endoglucanase，簡稱EG）是纖維素復合酶中的一個重要組成部分，內切葡聚糖苷酶主要作用于纖維素內部的非結晶區(qū)，隨即水解B-1，4-糖苷鍵，將長鏈纖維素分子截短，產生大量含非還原性末端的小分子纖維素。它在能源生物纖維素的有效利用方面占據著重要

3、的作用。本研究的最終目的是通過對內切葡聚糖苷酶的改造，尋找纖維素的有效轉化途徑，有效利用大量被浪費的纖維素資源，將纖維素降解為人類可使用的資源。本論文從以下幾方面開展工作，其結論如下：
　　 1.從綠色木霉菌中克隆出內切葡聚糖苷酶，序列全長為1257bp，編碼氨基酸418個，利用RT-PCR，在內切葡聚糖苷酶中未發(fā)現內含子。
　　 2.通過在EGⅡ基因3′端添加內質網滯留信號（KDEL序列），構建了p3300-35S-E