Salubrinal在氯化鋰-匹魯卡品致癇大鼠海馬神經元凋亡中的作用及機制.pdf

1、第一部分 Salubrinal對癲癇大鼠海馬神經元凋亡的保護作用及機制研究
　　目的
　　研究癲癇大鼠海馬神經元的凋亡及Salubrinal對凋亡的保護作用，并探討其機制。
　　方法
　　60只成年雄性并且健康的wistar大鼠隨機分為對照組、PILO組（氯化鋰-匹魯卡品誘導的大鼠癲癇模型）、Salubrinal(Sal)+PILO組及Sal組。TUNEL和免疫組化觀察對照組和處理組癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)后24h海

2、馬神經元的凋亡。Western blot實驗分析海馬elf2α、P-elf2α、Parkin及LC3的表達情況。
　　結果
　　1、PILO組與對照組相比海馬神經元存在明顯的凋亡。
　　2、較PILO組而言，Sal+PILO組海馬神經元凋亡明顯減輕。
　　3、Sal+PILO組與PILO組相比，海馬神經元P-elf2α表達量增高(P＜0.05)，而elf2α表達無明顯變化;LC3Ⅱ的表達量及Parkin顯著增高(

3、P＜0.05)。
　　結論
　　1、氯化鋰-匹魯卡品誘導的癲癇大鼠存在海馬神經元凋亡。
　　2、Salubrinal能夠減輕癲癇大鼠海馬神經元凋亡，其機制可能是Salubrinal通過elf2α磷酸化上調parkin表達、增加自噬水平，進而有效減少癲癇大鼠海馬神經元調亡。
　　關鍵詞:Salubrinal;elf2α;癲癇;自噬;凋亡
　　第二部分 Parkin介導的線粒體自噬對癲癇大鼠海馬神經元凋亡的保護

4、作用
　　目的
　　明確Parkin介導的線粒體自噬對癲癇大鼠海馬神經元凋亡的保護作用。
　　方法
　　用Parkin過表達重組腺病毒轉染大鼠海馬CA1區(qū)7天后，腹腔注射氯化鋰-匹魯卡品誘導大鼠顳葉癲癇模型。將60只健康雄性wistar大鼠隨機分為4組，野生型對照組（Ctr組）;匹魯卡品癲癇組（PI組）;匹魯卡品+Parkin過表達腺病毒組(PIPO組)以及Parkin過表達腺病毒組+生理鹽水（PO組）。觀察和比

5、較Ctr組和處理組癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)后24h海馬CA1區(qū)凋亡的變化。Western blot分析和比較各組海馬Parkin及LC3的蛋白表達情況。透射電鏡下觀察和比較各組大鼠海馬自噬小體和凋亡小體的數量。
　　結果
　　1、與Ctr組相比，PI組海馬CA1區(qū)凋亡數量明顯增多，而PIPO組海馬凋亡數量較PI組明顯減少(P＜0.05)。
　　2、與Ctr組相比，透射電鏡下PI組海馬神經元線粒體超微結構明顯破壞，自噬小體和

6、凋亡小體數量明顯增多;與PI組相比，PIPO組海馬神經元線粒體超微結構破壞減輕，自噬小體數量明顯增加，但凋亡小體數量明顯減少。
　　3、Western blot實驗分析顯示，與Ctr組相比，PI組Parkin表達水平降低，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高(P＜0.05)。與PI組比較，PIPO組Parkin和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均明顯升高(P＜0.05)
　　結論
　　1、氯化鋰-匹魯卡品誘導的癲癇大鼠海馬Parkin表達