谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的分離純化、熒光光譜以及外源物質(zhì)對(duì)其活性影響研究.pdf

1、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GST)是生物體中廣泛存在的蛋白酶，其功能是催化谷胱甘肽(GSH)親核性的巰基與親電性底物結(jié)合，從而降低親電性物質(zhì)對(duì)生物機(jī)體的傷害。從二十世紀(jì)七十年代發(fā)現(xiàn)谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶至今，對(duì)它的研究不斷深入，其在生物體中的功能也不斷被揭示，本文主要研究了谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的光譜學(xué)性質(zhì)、分析方法以及外化學(xué)物質(zhì)對(duì)昆蟲的谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的影響。全文共分五章，主要內(nèi)容如下：第一章系統(tǒng)綜述了谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶研究進(jìn)展，包括谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的分類、解毒機(jī)理、

2、結(jié)構(gòu)、純化、與昆蟲抗藥性的關(guān)系。 第二章通過(guò)親核層析純化分離了谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶，分離后得到電泳純產(chǎn)品，考察了谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的熒光光譜學(xué)性質(zhì)以及不同酸堿條件下熒光變化；通過(guò)熒光性氨基酸熒光移動(dòng)，揭示了其所處的微環(huán)境；初步研究了在不同物理處理?xiàng)l件酶活性的變化。 第三章研究了谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶活性測(cè)定方法，傳統(tǒng)方法是測(cè)定催化產(chǎn)物的吸光度，利用吸光度的變化來(lái)定義酶活性。本文嘗試用電化學(xué)方法，機(jī)理與光度法相似，但是以氯離子濃度變化來(lái)

3、表示酶活性，氯離子濃度用氯離子選擇性電極進(jìn)行測(cè)定。 第四章通過(guò)在食物中添加相關(guān)化學(xué)藥劑，研究了植物次生物質(zhì)煙堿、檸檬酸煙堿、蕓香苷對(duì)斜紋夜蛾體內(nèi)的谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶活性的影響，并測(cè)定了相關(guān)處理的斜紋夜蛾體內(nèi)谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的普通熒光、同步熒光光譜，結(jié)果表明不同次生物質(zhì)對(duì)谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的影響不一樣，有的具有誘導(dǎo)作用，有的具有抑制作用，在分子行為上表現(xiàn)為色氨酸殘基微環(huán)境極性變化。 第五章煙堿是煙草中含量較為豐富的次生代謝物，吸