重組?？窠?jīng)毒素對大鼠大腦皮層神經(jīng)元鈉通道的影響.pdf

1、?？窠?jīng)毒素(seaanemoneneurotoxin)是由46-49個氨基酸殘基組成的多肽，具有三個分子內(nèi)二硫鍵。研究表明，它們能特異的結(jié)合興奮性細(xì)胞的鈉通道受體位點(diǎn)3，阻斷或減緩鈉通道的失活，延長細(xì)胞的動作電位時程。而且對不同組織的鈉通道以及不同鈉通道亞型作用有差異。許多?？窠?jīng)毒素能與心臟，神經(jīng)和骨骼肌的鈉離子通道特異性地結(jié)合，因而它們能作為研究鈉通道的工具藥來使用。值得注意的是，許多抗癲癇的藥物(antiepilepticdru

2、gs，AEDs)是鈉通道的阻斷劑，有的藥物是作用于鈉通道失活過程從而達(dá)到治療的效果。鑒于?？窠?jīng)毒素的藥用價值和開發(fā)前景，本論文初步探討了重組?？窠?jīng)毒素對大鼠大腦皮層神經(jīng)元鈉通道的作用機(jī)制。 三種重組?？窠?jīng)毒素，即HK2a、HK7a和HK16a，具有47個氨基酸殘基，來源于側(cè)花?？?Anthopleurinsp.)。利用生物信息學(xué)分析軟件對三種新的海葵神經(jīng)毒素的氨基酸序列進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)與前人報道的?？窠?jīng)毒素Ap-C和Af

3、Ⅰ的同源性高，達(dá)95％。另外，三種海葵神經(jīng)毒素之間也是高度同源的，只在三個氨基酸位點(diǎn)存在突變，它們是14、22和25位氨基酸。 本論文利用腦片膜片鉗的方法研究了三種重組海葵神經(jīng)毒素，即HK2a、HK7a和HK16a，對SD大鼠大腦皮層神經(jīng)元鈉通道的影響。研究發(fā)現(xiàn)，三種重組?？窠?jīng)毒素都能抑制大鼠大腦皮層神經(jīng)元鈉電流，而不改變鈉通道最大激活電位。就它們與鈉通道的結(jié)合速度而言，HK7a最快，HK2a較慢，HK16a最慢。就抑制程度

4、而言，HK7a最強(qiáng)，HK16a和HK2a其次。 另一方面，HK7a既能增加鈉通道的延遲時間，又能降低鈉通道的最大激活電流峰值和延遲斜率；而HK2a和HK16a不改變鈉通道的延遲時間，對鈉通道最大激活電流峰值和延遲斜率有影響。 以上結(jié)果表明，HK7a延遲鈉通道失活的過程，是大鼠大腦皮層神經(jīng)元鈉通道失活態(tài)阻滯劑。HK2a和HK16a不影響鈉通道失活，可能作用于鈉通道激活過程，是大鼠大腦皮層神經(jīng)元鈉通道的阻滯劑。鑒于它們對