草漿用木聚糖酶生產(chǎn)菌株的篩選、分離純化及應(yīng)用效果研究.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文草漿用木聚糖酶生產(chǎn)菌株的篩選、分離純化及應(yīng)用效果研究姓名：陳建宏申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：曲音波20050523山東大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要自從1986年首次提出木聚糖酶用于紙漿漂白能夠減少化學(xué)漂白劑的用量以來，各國科學(xué)家對(duì)此都進(jìn)行了大量的研究工作在我國造紙業(yè)主要以麥草作為漿料來源，落后的制漿及漂白工藝對(duì)環(huán)境造成了極大的壓力。國內(nèi)科研工作者也為此做了很多研究工作，先后篩選到了一些高產(chǎn)木聚糖酶的菌株，我們實(shí)

2、驗(yàn)室也篩選到了黑曲霉An76(AspergillusnigerAn76)和短小芽孢桿菌A30(BacilluspumilusA30)等優(yōu)良菌株。目前主要存在的問題在于真菌的木聚糖酶耐堿性較差，這大大阻礙了其在生產(chǎn)中的應(yīng)用，而細(xì)菌木聚糖酶在麥草漿漂白中的效果卻不夠明顯，鑒于上述原因，使得篩選能夠耐堿性高產(chǎn)木聚糖酶的真菌成為一個(gè)新的研究方向。篩選到具有較好耐堿性的且對(duì)麥草漿漂白有明顯效果的真菌，它在生產(chǎn)中的應(yīng)用將會(huì)成為可能，也會(huì)大大促進(jìn)我國

3、造紙業(yè)的發(fā)展。從來源于造紙廠的堿性土樣中共分離得到數(shù)株能夠產(chǎn)堿性或中性木聚糖酶的真菌和細(xì)菌。經(jīng)搖瓶復(fù)篩后，篩選到4株相對(duì)酶活較高的菌株，經(jīng)過對(duì)麥草漿漂白實(shí)驗(yàn)，最終篩選出一株漂白效果較好的真菌ZCF57通過對(duì)ZCF57形態(tài)學(xué)觀察，初步確定其屬于青霉屬(Penicillium)。對(duì)其酶的基本性質(zhì)研究表明：ZCF57木聚糖酶作用的最適溫度為55℃，最適作用pH為60，在45(2以內(nèi)和pH5O～100之間有較好的穩(wěn)定性。金屬離子Fc2、Mn2和

4、M礦對(duì)酶有激活作用。對(duì)zCF57液體搖瓶產(chǎn)木聚糖酶的條件進(jìn)行了優(yōu)化，確定其最適產(chǎn)酶條件為：3％玉米芯粉為最佳碳源，l％豆餅粉為最佳氮源，pH為9O，溫度為32℃，轉(zhuǎn)速為150rpm，300ml三角瓶裝液量為50ml，在此條件下培養(yǎng)72小時(shí)，ZCF57木聚糖酶酶活可以達(dá)到550IU佃1以上經(jīng)優(yōu)化后酶活比優(yōu)化前提高了四倍。M礦，ca2和Fe2能夠促進(jìn)其生長及產(chǎn)酶，而c02和Cu2貝l!抑制其生長。表面活性劑吐溫80的添加能夠促進(jìn)其產(chǎn)酶，而S