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1、StudiesonPurificationandSeparationbyMembraneTechnologyofXylanaseDissertationSubmittedtoNanjingUniversityofTechnologyinpartialfulfillmentoftherequirementsforthedegreeofMasterofEngineeringByXilianLiSupervisor：ProfHongguiWa
2、nMay2008／／／jABSTRACTTheapplicationofxylanaseinsaccharificationoflignocellulosicsforxylooligosaccharidepreparation，inindustriesofpulpandpapermaking，andinfoodandfeedproductionattractedmuchinterestinthelastdecadesAprocessfo
3、rxylanaseproductionbyfermentationofPichiapastoris，thecharacterizationofproductxylanaseinthefermentationbroth，thefactorsinfluencingxylanaseactivitythepurificationoftheproduct，wasinvestigatedThemainresultswereasfollows：Xyl
4、anaseactivitywasdeterminedbyspectrophotometerusing3，5DinitrosalicylicacidfONS)colorimetryThemethodissimpleandrapidTheparameterswere：detectionwavelengthwasat540n】ccL，thelinearrangeofxylosewas03to09mg／mLThecalibrationequat
5、ionintheconcentrationrangewasY=00357104604X，(，=09994，n=6)，therelativestandarddeviationofprecisionWas0178to0335％Theoptimumconditionsfordeterminationofxylanaseactivitywere：1％ofxylan，pH60，reactiontemperatureat70℃，tenminuter
6、eactiontime，3mLDNS，5minutecolorationtime，theproportionofxylanasetosubstratewas1：9(v／v)(NH4)2S04Wasaddedtothefermentationbrothfiltrate，andtheprecipitatedmaterialWascollectedbycentrifugationCrudeenzymewasobtainedwith302％ac
7、tivityrecoverybySephacrylS—IOOHRgelpermeationchromatographyandeightfoldpurificationwasachievedTheresultshowedthatmolecularweightoftheunpurifiedxylanasewasestimatedtobe32to36KDabySDS—PAGE，anditbelongedtooneofthelowmolecul
8、arweightxylanasesTheobtainedxylanaseshowedgoodstabilitybetween55and60℃，andwasstablewithinpH5to7MetalionsCa2andZn2wereinhibitorstoxylanase，whileBa2andFe2werestrongstimulatorsTheMichaelMentenconstantofthexylanaseinenzymati
9、chydrolysisofxylanfrombirchwoodWas625mg／mLandthemaximalreactionratewas913pmol／mL’minCeramicmembranewithaperturesizeof014岫WasselectedforremovalofbiomassTheoptimaloperationconditionsofmembraneseparationofthefermentationbro
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