粗毛栓菌木聚糖酶的分離純化及性質(zhì)研究.pdf

1、木聚糖是植物半纖維素的主要組分，約占植物總糖的三分之一，是自然界中除纖維素以外含量最豐富的再生生物質(zhì)資源。木聚糖酶(xylanases)指專(zhuān)一降解木聚糖為寡木聚糖、低聚木糖、木二糖和木糖的一組酶的總稱(chēng)，它們廣泛存在于真核和原核生物中。木聚糖酶在造紙、食品、飼料和醫(yī)藥等工業(yè)中具有廣闊的應(yīng)用前景。粗毛栓菌Trametes gallica Fr．是一種白腐擔(dān)子菌，在我國(guó)分布廣泛，是楊木的一種主要生物降解者。已有研究表明，該菌具有較強(qiáng)降解木質(zhì)纖

2、維素的能力。本論文以粗毛栓菌為出發(fā)菌，對(duì)該菌在麥草粉基質(zhì)上所產(chǎn)生的三種木聚糖酶進(jìn)行了分離純化和酶學(xué)性質(zhì)的研究。 將粗毛栓菌在麥草粉固態(tài)基質(zhì)上培養(yǎng)40d，用去離子水浸提培養(yǎng)物得浸提液，再經(jīng)超濾濃縮、硫酸銨鹽析、Phenyl Sepharose CL-4B疏水層析、Sepharose—Qfast flow陰離子交換層析和Sephadex G-150分子篩層析等分離與純化步驟，獲得部分純化的木聚糖酶，其回收率和純化倍數(shù)分別為1.45％

3、和15.6。部分純化的木聚糖酶再經(jīng)活性—聚丙烯酰胺凝膠電泳(活性—PAGE)回收，獲得三種SDS—PAGE電泳純級(jí)的木聚糖酶同工酶組分，即Ⅺ、Ⅻ和ⅩⅢ(按等電點(diǎn)從大到大排列)。 對(duì)純化出的三種木聚糖酶同工酶組分進(jìn)行了酶學(xué)性質(zhì)研究，結(jié)果如下：用SDS—PAGE法測(cè)得三種同工酶的分子量均約為19.0KDa；等電聚焦法其等電點(diǎn)分別為5.6、4.7和4.0；苯酚一硫酸法測(cè)其含糖量依次為ⅩⅠ0.25％ⅩⅡ0.63％和ⅩⅢ3.4％。雙功能性