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文檔簡介
1、木聚糖是植物半纖維素的主要組分,約占植物總糖的三分之一,是自然界中除纖維素以外含量最豐富的再生生物質(zhì)資源。木聚糖酶(xylanases)指專一降解木聚糖為寡木聚糖、低聚木糖、木二糖和木糖的一組酶的總稱,它們廣泛存在于真核和原核生物中。木聚糖酶在造紙、食品、飼料和醫(yī)藥等工業(yè)中具有廣闊的應用前景。粗毛栓菌Trametes gallica Fr.是一種白腐擔子菌,在我國分布廣泛,是楊木的一種主要生物降解者。已有研究表明,該菌具有較強降解木質(zhì)纖
2、維素的能力。本論文以粗毛栓菌為出發(fā)菌,對該菌在麥草粉基質(zhì)上所產(chǎn)生的三種木聚糖酶進行了分離純化和酶學性質(zhì)的研究。 將粗毛栓菌在麥草粉固態(tài)基質(zhì)上培養(yǎng)40d,用去離子水浸提培養(yǎng)物得浸提液,再經(jīng)超濾濃縮、硫酸銨鹽析、Phenyl Sepharose CL-4B疏水層析、Sepharose—Qfast flow陰離子交換層析和Sephadex G-150分子篩層析等分離與純化步驟,獲得部分純化的木聚糖酶,其回收率和純化倍數(shù)分別為1.45%
3、和15.6。部分純化的木聚糖酶再經(jīng)活性—聚丙烯酰胺凝膠電泳(活性—PAGE)回收,獲得三種SDS—PAGE電泳純級的木聚糖酶同工酶組分,即Ⅺ、Ⅻ和ⅩⅢ(按等電點從大到大排列)。 對純化出的三種木聚糖酶同工酶組分進行了酶學性質(zhì)研究,結(jié)果如下:用SDS—PAGE法測得三種同工酶的分子量均約為19.0KDa;等電聚焦法其等電點分別為5.6、4.7和4.0;苯酚一硫酸法測其含糖量依次為ⅩⅠ0.25%ⅩⅡ0.63%和ⅩⅢ3.4%。雙功能性
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