木聚糖酶產(chǎn)生菌的篩選、發(fā)酵條件和酶純化的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、微生物木聚糖酶可以廣泛地應(yīng)用于紙漿生物漂白、功能性低聚木糖制造、面團(tuán)改良劑和飼料添加劑等。
　　 本論文通過(guò)平板篩選和搖瓶復(fù)篩，從土壤中篩選出一株高產(chǎn)木聚糖酶菌株LH-3。經(jīng)形態(tài)培養(yǎng)特征、生理生化特征及16SrDNA序列分析結(jié)果，該菌株鑒定為灰淺紅鏈霉菌（Streptomyces griseorubens）。
　　 對(duì)LH-3菌株的發(fā)酵產(chǎn)酶條件進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)其最佳培養(yǎng)基組成為（％，w/v）：稻草粉5.0，麩皮1.0，KN

2、O31.2，KH2PO40.05，Na2HPO40.05，MgSO4·7H2O0.05；最佳發(fā)酵條件為：種子培養(yǎng)時(shí)間為24h，接種量為14％，培養(yǎng)溫度為37℃，培養(yǎng)基初始pH值為11.0，搖床轉(zhuǎn)速為140 r/min，裝液量為100 mL/250mL以及培養(yǎng)時(shí)間為5d。在優(yōu)化的發(fā)酵條件下，菌株LH-3的酶活由35.05 U/mL提高到110 U/mL，是優(yōu)化前的3.14倍。
　　 菌株LH-3粗酶液經(jīng)過(guò)硫酸銨分級(jí)沉淀、透析濃縮和

3、Mono Q離子交換層析后，得到分子量分別約為32 KDa和45 KDa電泳純的兩種不同的木聚糖酶Xy1A和Xy1B，Xy1A酶活回收率為34％，純化倍數(shù)14.8倍。Xy1B酶活回收率為18％，純化倍數(shù)9.5倍。
　　 酶學(xué)性質(zhì)研究顯示Xy1A與Xy1B的最適酶促反應(yīng)pH分別為6.0和5.0，Xy1A的pH穩(wěn)定范圍為pH5.0～9.0，而Xy1B的穩(wěn)定范圍為pH3.0～8.0；Xy1A與Xy1B的最適反應(yīng)溫度分別為65℃和70℃

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