藥物性肝損傷的臨床特點(diǎn)、預(yù)后評(píng)估及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在利福平合用異煙肼致大鼠肝損傷中的作用.pdf

1、目的:
　　(1)總結(jié)藥物性肝損傷(DILI)的臨床特點(diǎn)，探討評(píng)估DILI預(yù)后的因素。
　　(2)探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)在利福平（RFP）合用異煙肼（INH）致大鼠肝損傷中的作用及可能機(jī)制。
　　方法:
　　(1)回顧性分析近5年我院DILI的臨床資料，運(yùn)用Logistic回歸分析篩選影響預(yù)后的指標(biāo)。
　　(2)將32只SPF級(jí)雄性Sprague-Dawley（SD)大鼠隨機(jī)分成4組，每組8只。正常對(duì)照組

2、（N組）：予以等量的生理鹽水每日定時(shí)空腹灌胃一次；RFP組（R組）：給予RFP50mg2 kg－12 d－1定時(shí)空腹灌胃一次；模型組（M組):INH和RFP各50mg2kg－12 d－1定時(shí)空腹灌胃一次；PBA組：INH和RFP同M組，再給予4-苯基丁酸（PBA）160mg2kg－12d－1腹腔注射一次；R組和 M組給予等量溶劑腹腔注射。連續(xù)14d后處死大鼠。留取大鼠血液和肝臟組織標(biāo)本。全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)大鼠血清中堿性磷酸酶(ALP)

3、、總膽紅素（TBIL)、直接膽紅素（DBIL)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST)、總膽汁酸（TBA)水平。HE染色觀察大鼠肝臟病理學(xué)改變。免疫印跡法檢測(cè)大鼠肝臟葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白（GRP78）、P65、IκB及膽鹽輸出泵（Bsep）蛋白的表達(dá)變化。免疫組化法檢測(cè)Bsep蛋白在大鼠肝細(xì)胞中的表達(dá)及定位變化。
　　結(jié)果:
　　DILI患者女性較多(57.5%)，平均年齡52歲，用藥以中藥、抗菌類及解熱鎮(zhèn)痛類為主。肝細(xì)胞型D

4、ILl多見(jiàn)(81.1％)，嚴(yán)重程度分級(jí)中以中度居多（54.7%），91.5%患者預(yù)后良好。不同嚴(yán)重程度肝細(xì)胞型DILI間Hy's法則符合率不同（P＜0.05），符合此法則的肝細(xì)胞型DILI患者肝衰竭的發(fā)生率為22.9%（11/48）。多因素回歸分析顯示：影響DILI預(yù)后的指標(biāo)有ALT(OR=1.672，P=0.026)、國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值（INR）(OR=8.852，P=0.015)。
　　(2)與N組相比，R組、M組大鼠血清TBIL

5、、DBIL、TBA及ALP均升高（P＜0.05），ALT及AST升高不明顯（P＞0.05）；R組大鼠肝臟病理學(xué)檢查可見(jiàn)肝細(xì)胞脂肪變性，M組可見(jiàn)肝細(xì)胞脂肪變性程度加重、部分可見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)和點(diǎn)灶狀壞死；R組、M組大鼠肝臟中GRP78和P65蛋白的表達(dá)量明顯上升（P＜0.05），IκB及Bsep蛋白的表達(dá)明顯下降（P＜0.05）。R組、M組肝胞膜上Bsep的平均積分光密度(IOD)分別為3.56±1.18和2.35±1.18，較正常組（9.6

6、3±1.59）下降（P＜0.05），M組肝胞膜上Bsep分布不規(guī)則。與M組相比，PBA組大鼠TBIL、DBIL、ALP及TBA均降低（P＜0.05）；肝臟病理學(xué)變化亦明顯改善；GRP78、P65明顯下調(diào)，IκB及Bsep明顯上調(diào)（P＜0.05）；肝胞膜上Bsep的平均IOD值為4.66±1.75，較M組上升（P＜0.05），肝胞膜上Bsep分布較M組規(guī)則。
　　結(jié)論:
　　(1)DILI患者大部分預(yù)后較好。發(fā)病時(shí)ALT及IN

7、R是預(yù)測(cè)DILI預(yù)后的獨(dú)立指標(biāo)。
　　(2)RFP可導(dǎo)致膽汁淤積和肝細(xì)胞脂肪變性，上調(diào)GRP78、P65及下調(diào)Bsep、IκB蛋白的表達(dá)，減少肝細(xì)胞膜上的Bsep并改變其定位。
　　(3)PBA可改善RFP合用INH所致的肝損傷，下調(diào)GRP78、P65及上調(diào)Bsep、IκB蛋白的表達(dá)，改善肝細(xì)胞膜上Bsep的表達(dá)和定位，提示ERS在RFP合用INH誘導(dǎo)的大鼠肝損傷中發(fā)揮重要作用，其可能機(jī)制是通過(guò)激活NF-κB，抑制Bsep表