酮康唑-姜黃素載藥納米系統(tǒng)抗菌活性協(xié)同作用的研究.pdf

1、白色念珠菌感染能夠引起諸多感染性疾病，威脅人類(lèi)的生命健康。多重耐藥真菌及生物膜的生成，導(dǎo)致真菌對(duì)抗真菌藥物的敏感性降低。如何提高抗真菌藥物的抗菌效果，已成為目前研究的熱點(diǎn)之一。酮康唑(Ketoconazole，KCZ)為唑類(lèi)廣譜抗真菌藥物，對(duì)于念珠菌、各種深部真菌引起的感染均有良好治療效果，但酮康唑嚴(yán)重的肝毒性限制了其臨床應(yīng)用。減少酮康唑用藥劑量，提高其療效成為亟待解決的重要任務(wù)。姜黃素(Curcumin，CUR)是一種安全的天然化合物

2、，已有研究表明姜黃素能夠與唑類(lèi)抗真菌藥物聯(lián)合應(yīng)用提高抗白色念珠菌能力。但酮康唑與姜黃素為疏水性藥物，生物利用率低，限制了兩者在臨床方面的應(yīng)用。聚合物膠束載藥系統(tǒng)能夠克服藥物水溶性差、物理化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定等問(wèn)題，在降低藥物的毒副作用同時(shí)，藥物能較長(zhǎng)時(shí)間維持在有效濃度范圍內(nèi)，對(duì)傳統(tǒng)抗真菌藥物的臨床研究與應(yīng)用起推動(dòng)作用，具有潛在的研究意義。
　　本文合成不同分子量的單甲氧基聚乙二醇-聚己內(nèi)酯(Methoxy poly(ethylenegl

3、ycol)-b-poly(e-caprolactone)，MPEG-PCL)兩親性嵌段共聚物，結(jié)構(gòu)經(jīng)核磁共振氫譜(1H-NMR)及紅外光譜（FT-IR）進(jìn)行了確證，并經(jīng)凝膠滲透色譜(GPC)測(cè)定不同PCL鏈段聚合物分子量。薄膜水化法制備KCZ載藥膠束(KCZ-M)，對(duì)影響載藥膠束包封率和載藥量的單因素進(jìn)行考察。在單因素考察結(jié)果基礎(chǔ)上，經(jīng)正交設(shè)計(jì)篩選出最佳膠束制備工藝。研究結(jié)果表明，當(dāng)MPEG/PCL重量比為1∶1.7時(shí)，聚合物材料70

4、mg，原料藥10 mg，水化溫度60℃，水化時(shí)間30 min，得到KCZ載藥納米膠束，載藥量與包封率最高，分別為85.27±1.75％、11.31±1.05％，CUR載藥納米膠束(CUR-M)的載藥量與包封率分別為91.19±0.83％、11.90±0.11％。KCZ載藥膠束的水溶性比KCZ原料藥相比提高85倍，CUR載藥膠束的水溶性比CUR原料藥提高了82900倍，水溶性得到明顯改善。采用動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)(DLS)及透射電鏡(TEM)對(duì)

5、酮康唑及姜黃素載藥膠束進(jìn)行了表征。酮康唑與姜黃素載藥納米膠束粒徑小且分布均勻，平均粒徑分別為44.70±1.91 nm、39.56±0.19 nm。傅里葉紅外光譜(FT-IR)、X-射線(xiàn)衍射(XRD)對(duì)載藥膠束進(jìn)行表征，研究發(fā)現(xiàn)KCZ與CUR成功包裹進(jìn)納米膠束，并以無(wú)定型、非結(jié)晶形式存在。動(dòng)態(tài)透析體外釋放實(shí)驗(yàn)表明，載藥膠束能控制藥物的釋放，藥物從載藥膠束中的釋放呈現(xiàn)緩慢釋放行為。KCZ-M體外釋放動(dòng)力學(xué)符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)模型，藥物釋放速度與

6、藥物濃度成正比。CUR-M體外釋放動(dòng)力學(xué)符合零級(jí)動(dòng)力學(xué)模型，藥物釋放量與時(shí)間成正比。采用棋盤(pán)法和抑菌圈法對(duì)姜黃素及酮康唑載藥膠束聯(lián)合用藥開(kāi)展了體外抑菌活性實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，低劑量的CUR-M(1.40～22.5μg/mL)即可改善KCZ-M的抗菌活性，二者的聯(lián)合抑菌指數(shù)FICI僅為0.073，表現(xiàn)出明顯的協(xié)同抗菌作用。以白色念珠菌為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，XTT減低法以及激光共聚焦顯微鏡法對(duì)復(fù)配制劑抑膜活性的進(jìn)一步研究表明，CUR-M可明顯提高KC