Raf、MEK和ERK在垂體腺瘤中的表達(dá)對(duì)比研究.pdf

1、目的：通過(guò)免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry，IHC）和蛋白質(zhì)印跡（western blot，WB）兩種方法，研究Raf、MEK和ERK在侵襲性垂體腺瘤（invasive pituitary adenoma,IPA）/非侵襲性垂體腺（non-invasive pituitary adenoma,NIPA）和功能性垂體腺瘤（functional pituitary adenoma,FPA）/無(wú)功能性垂體腺瘤（non-f

2、unctional pituitary adenoma,NFPA）兩種分組方法中的表達(dá)，并分析Raf、MEK和ERK三種因子分別在上述兩種垂體腺瘤分組方法中的表達(dá)是否不同，進(jìn)一步闡明該通道在垂體腺瘤（pituitary adenoma,PA）中的作用，期待為垂體腺瘤的治療找出新的靶點(diǎn)依據(jù)。
　　方法：選取河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院神經(jīng)外科2014年6月至2015年12月經(jīng)鼻蝶手術(shù)切除垂體腺瘤標(biāo)本60例。將其按侵襲性垂體腺瘤/非侵襲性垂體

3、腺和功能性垂體腺瘤/無(wú)功能垂體腺瘤兩種分組方法進(jìn)行分組（見(jiàn)Table1）。采用免疫組織化學(xué)和蛋白質(zhì)印跡兩種方法，分別檢測(cè)Raf、MEK和ERK在侵襲性垂體腺瘤/非侵襲性垂體腺組之間和功能性垂體腺瘤/無(wú)功能垂體腺瘤組之間的表達(dá)情況。由兩名病理醫(yī)師采用雙盲法閱片和雙評(píng)分半定量法進(jìn)行免疫組化光鏡分析評(píng)分，根據(jù)評(píng)分結(jié)果統(tǒng)計(jì)各組中Raf、MEK和ERK的陽(yáng)性數(shù)及陽(yáng)性表達(dá)率；用labwork分析軟件分析出Raf、MEK、ERK三種蛋白的灰度值，將內(nèi)

4、參β-actin的灰度值作為對(duì)照，計(jì)算出Raf、MEK和ERK與之相比的相對(duì)值進(jìn)行蛋白質(zhì)印記分析。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)資料中，計(jì)數(shù)資料運(yùn)用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±S）表示，運(yùn)用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。所有資料統(tǒng)計(jì)學(xué)處理均運(yùn)用IBM SPSS Statistics19軟件完成，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、免疫組織化學(xué)結(jié)果
　　1.1 侵襲組與非侵襲組比較結(jié)果
　　

5、在侵襲組30例中Raf、MEK和ERK三種因子的陽(yáng)性表達(dá)數(shù)及陽(yáng)性表達(dá)率分別為28（93.33％）例、26例（86.66%）和27例（90.00%）；非侵襲組30例中Raf、MEK和ERK三種因子的陽(yáng)性數(shù)及陽(yáng)性率分別為20（66.66%）例、16例（53.33%）和18例（60.00%）。兩組之間三種因子的例數(shù)和有效率相比較，侵襲組明顯高于非侵襲組，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（見(jiàn)Table2）。
　　1.2

6、功能組與無(wú)功能組比較結(jié)果
　　在功能組28例中Raf、MEK和ERK三種因子的陽(yáng)性表達(dá)數(shù)及陽(yáng)性表達(dá)率分別為22（78.57%）、19（67.85%）和23（82.14%）；無(wú)功能組32例中Raf、MEK和ERK三種因子的陽(yáng)性表達(dá)數(shù)及陽(yáng)性表達(dá)率分別為26（81.25%）、23（71.87%）和22（68.75%）。兩組之間三種因子的例數(shù)和有效率相比較無(wú)明顯差異，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（見(jiàn)Table3）。<

7、br>　　2、蛋白質(zhì)印記結(jié)果
　　2.1 侵襲組與非侵襲組結(jié)果比較
　　在侵襲組30例中Raf、MEK和ERK三種因子的蛋白表達(dá)量分別為0.7276±0.14067、0.2585±0.03339和0.3873±0.06493；在非侵襲組30例中Raf、MEK和ERK三種因子的蛋白表達(dá)量分別為0.1465±0.06036、0.1073±0.03601和0.2587±0.06493。兩組中三種因子相比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析兩組之間差異有

8、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（見(jiàn)Table4）。
　　2.2 功能組與無(wú)功能組結(jié)果比較
　　在功能組28例中Raf、MEK和ERK三種因子的蛋白表達(dá)量分別為0.4316±0.30472、0.1837±0.08288和0.3226±0.10571；在無(wú)功能組32例中Raf、MEK和ERK三種因子的蛋白表達(dá)量分別為0.4416±0.32394、0.1819±0.08581和0.3234±0.07986。兩組中三種因子相比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)

9、分析兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（見(jiàn)Table5）。
　　結(jié)論：
　　1、侵襲性垂體腺瘤中Raf、MEK和ERK的表達(dá)均明顯高于非侵襲性垂體腺瘤。
　　2、功能性垂體腺瘤與無(wú)功能垂體腺瘤組之間Raf、MEK和ERK的表達(dá)無(wú)明顯差異。
　　3、Raf、MEK和ERK在垂體腺瘤的發(fā)生、發(fā)展及侵襲方面發(fā)揮著重要作用。
　　4、侵襲性垂體腺瘤中Raf、MEK和ERK的高表達(dá)為垂體腺瘤的靶向治療提供了新的