三個STR基因座熒光標記復合擴增的研究及其法醫(yī)學應用.pdf

1、目的:本課題旨在尋找新的有應用價值的STR基因座，并建立D12S1064、GATA140E03、D18S536基因座的熒光標記復合擴增體系。按照美國DNA分析方法技術工作組(TWGDAM)的指導方案，進行了法醫(yī)學應用性研究。 方法:首先對5個新的STR基因座，即D9Slll9、D12S1064、D18S536、GATAl56D11和GATAl40E03，進行群體遺傳學研究。從中獲得三個多態(tài)性好、個人識別機率高的三個基因座，即D1

2、2S1064、GATAl40E03、D18S536，利用傳統(tǒng)的復合擴增的方法，用美國ABI-310毛細管電泳儀進行熒光標記復合擴增的研究。并對復合擴增系統(tǒng)的靈敏度和準確度，基因座的種屬特異性，不同退火溫度下復合擴增的效果等進行了重復性研究。 結果:獲得了5個STR基因座的基因頻率、個人識別率、非父排除率等法醫(yī)鑒定中所需要的遺傳學數據；成功建立了D12S1064、GATAl40E03、D18S536的熒光標記復合擴增體系。而且，這

3、一擴增體系條件易于優(yōu)化，采用國產Taq酶不需熱啟動進行擴增，即可得到滿意的擴增產物和分型結果。因此相對于國外昂貴的試劑盒，它是一種成本低廉但效率高的STR基因座復合擴增體系。法醫(yī)學應用性研究表明，該體系的檢測靈敏度為2ng模板DNA，而且三個基因座有較高的種屬特異性。通過8個實際檢案證明，該體系能用于法醫(yī)學個人識別和親權鑒定。 結論:D12S1064、GATAl40E03、D18S536的熒光標記復合擴增體系可應用ABI-310