三個(gè)STR基因座熒光標(biāo)記復(fù)合擴(kuò)增的研究及其法醫(yī)學(xué)應(yīng)用.pdf

1、目的:本課題旨在尋找新的有應(yīng)用價(jià)值的STR基因座，并建立D12S1064、GATA140E03、D18S536基因座的熒光標(biāo)記復(fù)合擴(kuò)增體系。按照美國(guó)DNA分析方法技術(shù)工作組(TWGDAM)的指導(dǎo)方案，進(jìn)行了法醫(yī)學(xué)應(yīng)用性研究。 方法:首先對(duì)5個(gè)新的STR基因座，即D9Slll9、D12S1064、D18S536、GATAl56D11和GATAl40E03，進(jìn)行群體遺傳學(xué)研究。從中獲得三個(gè)多態(tài)性好、個(gè)人識(shí)別機(jī)率高的三個(gè)基因座，即D1

2、2S1064、GATAl40E03、D18S536，利用傳統(tǒng)的復(fù)合擴(kuò)增的方法，用美國(guó)ABI-310毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行熒光標(biāo)記復(fù)合擴(kuò)增的研究。并對(duì)復(fù)合擴(kuò)增系統(tǒng)的靈敏度和準(zhǔn)確度，基因座的種屬特異性，不同退火溫度下復(fù)合擴(kuò)增的效果等進(jìn)行了重復(fù)性研究。 結(jié)果:獲得了5個(gè)STR基因座的基因頻率、個(gè)人識(shí)別率、非父排除率等法醫(yī)鑒定中所需要的遺傳學(xué)數(shù)據(jù)；成功建立了D12S1064、GATAl40E03、D18S536的熒光標(biāo)記復(fù)合擴(kuò)增體系。而且，這

3、一擴(kuò)增體系條件易于優(yōu)化，采用國(guó)產(chǎn)Taq酶不需熱啟動(dòng)進(jìn)行擴(kuò)增，即可得到滿意的擴(kuò)增產(chǎn)物和分型結(jié)果。因此相對(duì)于國(guó)外昂貴的試劑盒，它是一種成本低廉但效率高的STR基因座復(fù)合擴(kuò)增體系。法醫(yī)學(xué)應(yīng)用性研究表明，該體系的檢測(cè)靈敏度為2ng模板DNA，而且三個(gè)基因座有較高的種屬特異性。通過(guò)8個(gè)實(shí)際檢案證明，該體系能用于法醫(yī)學(xué)個(gè)人識(shí)別和親權(quán)鑒定。 結(jié)論:D12S1064、GATAl40E03、D18S536的熒光標(biāo)記復(fù)合擴(kuò)增體系可應(yīng)用ABI-310