三個miniSTR遺傳標(biāo)記及其熒光標(biāo)記復(fù)合擴增的法醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究.pdf

1、目的:miniSTR技術(shù)是當(dāng)今法醫(yī)物證學(xué)研究高度降解檢材的熱點，本課題旨在研究3個miniSTR基因座(DlOS1248，D14S1434和D22S1045)在中國成都漢族人群中的特征，構(gòu)建復(fù)合擴增熒光標(biāo)記檢測系統(tǒng)及評估其法醫(yī)學(xué)應(yīng)用價值。 方法:使用Coble的引物，在中國成都200個無關(guān)漢族個體中進行3個miniSTR基因座PCR擴增，擴增產(chǎn)物使用聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，銀染法顯色，以獲得群體基本數(shù)據(jù)。建立這3個miniSTR

2、基因座的復(fù)合擴增體系，利用熒光復(fù)合擴增技術(shù)擴增，ABI PRISM<'R>310基因分析儀對產(chǎn)物進行檢測，GeneScan3.7及Geno Typer3.7軟件分析結(jié)果；并按照美國DNA分析方法技術(shù)工作組(Scientific Working Group on DNAAnalysis Methods，SWGDAM)的指導(dǎo)方案進行法醫(yī)學(xué)應(yīng)用性研究，用不同的組織、不同的介質(zhì)、常見的動物對復(fù)合擴增系統(tǒng)進行測試，用實際案例進行驗證。 結(jié)

3、果:獲得了3個miniSTR基因座的基因頻率、個人識別率、非父排除率等群體遺傳學(xué)數(shù)據(jù)，在D10S1248基因座觀察到了新的等位基因8，在D14S1434基因座發(fā)現(xiàn)了不同的重復(fù)序列；通過采用復(fù)合擴增方法，建立了D10S1248、D14S1434和D22S1045熒光標(biāo)記復(fù)合擴增體系。法醫(yī)應(yīng)用性研究證明該體系與12種常見動物和微生物無交叉反應(yīng)；可對2ng的微量DNA模板分型；對同一個體的不同組織檢測結(jié)果一致；能夠?qū)ΤＲ娊橘|(zhì)上的斑痕檢材正確分

4、型；對放置20年的陳舊血痕仍然可分型；應(yīng)用于案例檢測，結(jié)果與鑒定結(jié)論一致。 結(jié)論:3個miniSTR遺傳標(biāo)記(D10S1248，D14S1434和D22S1045)在中國人群中有較高的多態(tài)性及較高的個人識別率，在不同的人群中存在遺傳差異。建立了這3個miniSTR基因座的熒光標(biāo)記復(fù)合擴增體系miniplex，該體系可運用于熒光標(biāo)記毛細管電泳激光自動分析檢測平臺，具備法醫(yī)學(xué)實踐應(yīng)用的可行性，為分析DNA降解檢材提供了一個有效的途徑