不良心理應激通過EGFR及其下游信號通路影響人卵巢癌荷瘤裸鼠腫瘤發(fā)生、發(fā)展的實驗研究.pdf

1、研究背景與目的：
　　卵巢癌是女性生殖器常見的惡性腫瘤，與宮頸癌、子宮內膜癌合并稱女性生殖器三大惡性腫瘤。由于卵巢在盆腔的位置較深，大部分卵巢癌患者在有癥狀被確診的時候已發(fā)展到疾病晚期，且該疾病具有易轉移、易廣泛播散，易對化療藥物發(fā)生耐藥等特點，使其死亡率高，在婦科惡性腫瘤中排第一。近些年來，由于醫(yī)學模式的轉換，心理與腫瘤的關系、心理干預運用于腫瘤治療等研究逐漸成為醫(yī)學研究所關注的重點。通過對現(xiàn)有文獻報道的分析，不良心理應激在卵巢

2、癌發(fā)生、發(fā)展過程中起關鍵性作用，其內在機制不完全清楚。前期研究提示EGFR及其介導的下游信號通路的異常激活可以促進腫瘤細胞增殖、促進腫瘤血管形成、病灶轉移并減少腫瘤細胞凋亡，與卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關，其中PI3K/AKT通路及Ras/Raf/MEK/ERK通路是EGFR下游兩條主要的信號通路。迄今為止，關于不良心理應激可促進卵巢癌密切相關信號通路的激活，并且通過這些通路的激活促進腫瘤的發(fā)生、發(fā)展的相關研究國內外暫無報道。本研究試圖通

3、過建立人卵巢癌荷瘤裸鼠皮下移植瘤模型，探討不良心理應激是否通過EGFR及其下游信號通路影響人卵巢癌腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，為卵巢癌心理治療及分子靶向治療提供新思路。
　　研究方法：
　　購置鼠齡4～6周齡的雌性BALB/C（nu/nu）裸鼠，稱重，隨機分兩組，每組12只。A組：荷瘤組—皮下移植人卵巢癌組織瘤塊，不給予應激。B組：荷瘤+應激組—皮下移植人卵巢癌組織瘤塊，給予應激。構建不良心理應激人卵巢癌荷瘤裸鼠皮下移植瘤模型。定期觀

4、察裸鼠的生存狀態(tài)、裸鼠皮下腫瘤的生長，測量腫瘤結節(jié)的最長徑（a）及最短徑(b)，描繪腫瘤生長曲線圖。結束應激后第二天，處死全部裸鼠（A組、B組），剝取腫瘤稱重，比較A、B兩組裸鼠生存狀態(tài)、裸鼠重量、皮下移植瘤的體積及重量，通過免疫組化染色、Western blot實驗方法檢測A、B兩組皮下移植瘤組織中EGFR、AKT/ρ-AKT、ERK/ρ-ERK、VEGF蛋白表達情況。
　　結果：
　　1、成功構建不良心理應激人卵巢癌荷瘤

5、裸鼠皮下移植瘤模型。
　　2、不良心理應激對卵巢癌荷瘤裸鼠生存狀態(tài)、重量及皮下移植瘤體積、重量的影響：
　?。?）與荷瘤組裸鼠相比，荷瘤+應激組裸鼠飲食、活動、精神狀態(tài)較差。
　　（2）荷瘤組實驗后裸鼠體重較實驗前明顯增加(P<0.01)，荷瘤+應激組實驗后裸鼠體重有所降低。實驗后荷瘤+應激組裸鼠體重明顯低于荷瘤組(P<0.01)。
　?。?）實驗后荷瘤+應激組皮下移植瘤體積明顯大于荷瘤組(P<0.01)，荷瘤+

6、應激組皮下移植瘤生長速度明顯大于荷瘤組。
　?。?）實驗后荷瘤+應激組皮下移植瘤重量明顯高于荷瘤組(P<0.01)，荷瘤+應激組皮下移植瘤生長速度明顯大于荷瘤組。
　　3、免疫組化染色檢測荷瘤組與荷瘤+應激組中EGFR、AKT/ρ-AKT、ERK/ρ-ERK、VEGF蛋白表達情況：荷瘤+應激組皮下移植瘤組織石蠟切片中EGFR、AKT/ρ-AKT、ERK/ρ-ERK、VEGF蛋白免疫組化評分明顯高于荷瘤組(P<0.05)，VE