染料木黃酮對(duì)卵巢癌HO-8910PM細(xì)胞裸鼠移植瘤影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、卵巢癌是女性生殖道惡性腫瘤中死亡率最高的疾病，由于化療耐藥現(xiàn)象日漸突出，導(dǎo)致臨床療效明顯降低。因此，尋求卵巢癌新的治療方法具有重要意義。 染料木黃酮是植物雌激素的一種，存在于豆類等植物中。近來染料木黃酮在腫瘤治療方面的作用越來越受到重視。在對(duì)乳腺癌、前列腺癌和結(jié)腸癌體內(nèi)外的研究表明，染料木黃酮對(duì)腫瘤細(xì)胞有明顯抑制作用。但是，關(guān)于染料木黃酮對(duì)卵巢癌裸鼠移植瘤的影響未見報(bào)道。我們?cè)O(shè)想染料木黃酮應(yīng)該可以在體內(nèi)水平抑制卵巢癌的生長(zhǎng)。本課

2、題擬建立卵巢癌裸鼠移植瘤模型，從細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、腫瘤血管生成及聯(lián)合順鉑應(yīng)用等多方面研究染料木黃酮對(duì)卵巢癌的作用機(jī)制，為探索卵巢癌臨床治療新途徑提供理論和實(shí)踐依據(jù)。 本實(shí)驗(yàn)分為以下兩部分：一、卵巢癌裸鼠移植瘤模型的建立及染料木黃酮對(duì)其影響機(jī)制的探討使用BALB/c遺傳背景的雌性裸小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，4-5周齡，按SPF級(jí)飼養(yǎng)。卵巢癌上皮細(xì)胞株HO-8910PM用含有15％小牛血清RPMI1640在37℃、5％CO2條件下培養(yǎng)。于

3、每只裸鼠背部皮下注射4×106個(gè)細(xì)胞，建立卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型。待移植瘤生長(zhǎng)至直徑約0.4cm時(shí)，將20只荷瘤裸鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、5mg/kg染料木黃酮組、25mg/kg染料木黃酮組和50mg/kg染料木黃酮組。30d后處死裸鼠，稱瘤重，移植瘤標(biāo)本用免疫組化SP法檢測(cè)各組移植瘤組織中增殖核抗原(PCNA)的表達(dá)和微血管密度(MVD)。結(jié)果表明：①染料木黃酮可抑制卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生長(zhǎng)，染料木黃酮25mg/kg組和50mg/kg組移

4、植瘤質(zhì)量抑瘤率分別為(18.50％)和(38.07％)；②染料木黃酮治療后，腫瘤PCNA和MVD表達(dá)下降，劑量效應(yīng)呈正相關(guān)；③染料木黃酮治療后裸鼠體質(zhì)量增加，重要臟器未見異常。結(jié)論：①染料木黃酮可通過抑制卵巢癌細(xì)胞增殖和微血管生成，發(fā)揮抑瘤作用；②染料木黃酮最佳治療劑量為50mg/kg；③應(yīng)用染料木黃酮治療可增加體質(zhì)量，無明顯毒副作用。 二、染料木黃酮聯(lián)合順鉑應(yīng)用對(duì)卵巢癌HO-8910PM裸鼠移植瘤的作用及其機(jī)制同實(shí)驗(yàn)一方法建立

5、卵巢癌裸鼠移植瘤模型，待移植瘤生長(zhǎng)至直徑約0.4cm時(shí)，將荷瘤裸鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、染料木黃酮組(50mg/kg)、順鉑組(5mg/kg)和染料木黃酮(50mg/kg)及順鉑(5mg/kg)聯(lián)合治療組。30d后處死裸鼠，稱瘤重，移植瘤標(biāo)本用免疫組化SP法檢測(cè)移植瘤組織中Bcl-2的表達(dá)，用TUNEL法進(jìn)行原位細(xì)胞凋亡分析，計(jì)算細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)，光鏡及電鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。結(jié)果表明：①染料木黃酮組、順鉑組卵巢癌移植瘤生長(zhǎng)均受到不同程度的抑