血管抑素基因轉(zhuǎn)染及聯(lián)合化療治療人卵巢癌裸鼠移植瘤的實驗研究.pdf

1、原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均己在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。論文作者簽名:乃‘‘r日期:.7Y58關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解山東大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版

2、，允許論文被查閱和借閱本人授權(quán)山東大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名:導(dǎo)師簽名:3A_“日期:sow4.Yd山東大學(xué)博士學(xué)位論文腹水瘤實驗:裸鼠腹腔接種卵巢癌細(xì)胞后被隨機(jī)分為空質(zhì)粒組、基因治療組、化療組和聯(lián)合治療組，待7天后先進(jìn)行基因治療再進(jìn)行化療?；蛑委煏r分別向各組裸鼠腹腔內(nèi)注射空質(zhì)粒pcDNA3.Angi

3、ostatinpcDNA3、生理鹽水、AngiostatinpcDNA3，化療時向化療組和聯(lián)合治療組裸鼠腹腔內(nèi)注射順鉑溶液。觀察各組裸鼠的腹水量、腹腔瘤負(fù)荷，取腫瘤標(biāo)本作免疫組織化學(xué)檢查(SABC法)及蛋白質(zhì)印跡(WesternBlotting)檢查，檢測各組腫瘤Angiostatin的表達(dá)和微血管密度(MVD)，利用TUNEL染色法行原位細(xì)胞凋亡分析。采用SPSS11.5統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。免疫組化和腹腔荷瘤量的統(tǒng)計分析采用才檢

4、驗。其它實驗數(shù)據(jù)以X士s表示，采用單因素方差分析(SNK法)檢驗。當(dāng)P0.05時，統(tǒng)計一學(xué)上具備顯著性差異。結(jié)果:1.對于人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型:Angiostatin基因治療具有抑制腫瘤生長的作用，但是不能消滅腫瘤，腫瘤以緩慢的速度生長。Angiostatin基因治療組的腫瘤組織中呈現(xiàn)Angiostatin局部高表達(dá)，微血管密度(MVD)低于對照組，VEGF表達(dá)高于對照組。細(xì)胞凋亡指數(shù)(Al)高于對照組，統(tǒng)計學(xué)檢驗有顯著性差異(P

5、0.01)。2.對于人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型:Angiostatin基因治療可以明顯抑制腹腔內(nèi)腫瘤及腹水的形成(P0.05)，腫瘤組織內(nèi)呈現(xiàn)Angiostatin的高表達(dá)，MVD明顯下降，腫瘤細(xì)胞凋亡明顯增加與化療藥物順鉑聯(lián)合應(yīng)用后產(chǎn)生協(xié)同作用，抑瘤作用比單用Angiostatin或順鉑更加明顯(P0.05).結(jié)論:1.Angiostatin基因可以通過抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增生而抑制腫瘤生長，其作用的發(fā)揮是獨立于VEGF的。2.Angio