金釵石斛總生物堿對APP-PS1轉(zhuǎn)基因小鼠學(xué)習(xí)記憶影響及其相關(guān)因素研究.pdf

1、目的：觀察金釵石斛總生物堿對APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響。
　　方法：將7月齡雄性APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠24只隨機均分為兩組：APP/PS1組（APP/PS1+vehicle），APP/PS1給藥組（APP/PS1+DNLA）；同性別同月齡同窩野生型（WT）小鼠24只隨機均分為兩組：正常對照組（WT+vehicle），正常給藥組（WT+DNLA）。APP/PS1給藥組、正常給藥組每日一次灌胃金釵石斛生物總堿40

2、mg/kg，正常對照組、APP/PS1組灌胃給予等體積生理鹽水（NS），連續(xù)6個月。Morris水迷宮檢測小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力。行為學(xué)檢測結(jié)束后，麻醉小鼠，取材，硫磺素-S染色法檢測小鼠皮質(zhì)區(qū)老年斑；尼氏染色法檢測小鼠海馬神經(jīng)元存活情況；電鏡觀察海馬神經(jīng)元-突觸結(jié)構(gòu)的改變；ELISA檢測小鼠血清中IL-1β的含量；Western blot法檢測小鼠海馬Aβ1-40、Aβ1-42含量和GFAP、IL-6、COX-2、p-NF-κB、p-p

3、38、SYP、PSD-95蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：⑴與正常對照組小鼠相比，APP/PS1組逃避潛伏期（escape latency）明顯延長，穿越原平臺次數(shù)顯著減少、原平臺象限游泳距離百分比明顯下降、原平臺象限游泳時間顯著縮短；大腦皮質(zhì)區(qū)老年斑大量形成；海馬CA1區(qū)細(xì)胞出現(xiàn)深染固縮現(xiàn)象且尼氏體數(shù)量減少；海馬中神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)破壞，突觸密度降低且不均一，突觸間隙模糊不清。Aβ1-40、Aβ1-42含量明顯增加；GFAP、IL-6、COX

4、-2、p-NF-κB、p-p38蛋白表達(dá)明顯增加；SYP、PSD-95蛋白表達(dá)明顯降低。⑵正常給藥組較正常對照組小鼠上述指標(biāo)沒有明顯差異。⑶APP/PS1給藥組較APP/PS1組逃避潛伏期明顯縮短，穿越原平臺次數(shù)顯著增加、原平臺象限游泳距離百分比明顯上升、原平臺象限游泳時間顯著延長；大腦皮質(zhì)區(qū)老年斑數(shù)量明顯減少且多為小體積；海馬CA1區(qū)細(xì)胞深染固縮現(xiàn)象減少且尼氏體數(shù)目增多；海馬中神經(jīng)元-突觸結(jié)構(gòu)基本正常，突觸前后膜厚薄程度一致，突觸前膜