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文檔簡介
1、人類基因組計劃完成后,功能基因組學成為主要研究方向,而抗體在基因的結構與功能研究中具有十分重要的作用,制備高效價的抗體是示蹤新基因的表達和研究新基因功能的首要前提。單克隆抗體雖然特異性好,但其制備復雜費時,兔多克隆抗體的制備則簡單、快速,便于科研工作的有效開展。 目的:通過以合成多肽為抗原來制備兔多克隆抗體,并優(yōu)化實驗條件,為今后實驗室多克隆抗體制備實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化建立初步基礎。 方法:本研究以生物信息學軟件來分析蛋白序列
2、選擇抗原表位后,通過Fmoc法固相合成相應的多肽,經(jīng)過液相色譜純化及質譜儀鑒定合成正確后,與KLH蛋白偶聯(lián)免疫新西蘭雄兔,多次加強免疫后獲得血清,并進行ELISA或Western Blot檢測。 結果:成功合成并純化了43條多肽,并在免疫后能夠得到所需多克隆抗體。 結論:以合成多肽制備兔多克隆抗體可在本實驗室獨立完成,結合實驗室實際條件,歸納總結了完整的多克隆抗體制備流程,為今后實驗室抗體制備的產(chǎn)業(yè)化建立了一定基礎。
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