人食管鱗狀細(xì)胞癌Fas-FasL蛋白表達(dá)與人乳頭瘤病毒的關(guān)系.pdf

1、目的:食管癌(Esophageal Carcinoma，EC)是一種常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤，在世界范圍腫瘤致死疾病中位居第6位。我國(guó)處于食管癌高發(fā)帶上，發(fā)病率最高的是河北省與河南省。食管鱗狀細(xì)胞癌占所有食管癌的90％，其發(fā)病原因尚未闡明，營(yíng)養(yǎng)不良、吸煙、飲酒以及過(guò)熱飲食等環(huán)境因素都與其密切相關(guān)。人乳頭瘤病毒（Human Papillomavirus，HPV）是一種雙鏈環(huán)形DNA病毒，可以感染上皮組織，包括口腔食管組織及肛門(mén)生殖器官。最近有

2、相關(guān)報(bào)道稱(chēng)，HPV感染有可能是食管鱗狀細(xì)胞癌的誘因之一?，F(xiàn)已被證明HPV會(huì)抑制宮頸鱗狀細(xì)胞Fas/FasL凋亡途徑，誘發(fā)癌變，而其在食管鱗狀細(xì)胞癌中的作用尚未明確。為進(jìn)一步明確HPV在食管鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用，本研究首先要明確我省食管鱗狀細(xì)胞癌中HPV的感染率以及Fas/FasL蛋白的表達(dá)情況，分析HPV感染與Fas/FasL蛋白表達(dá)的關(guān)系，希望從細(xì)胞凋亡方面揭示食管鱗狀細(xì)胞癌與HPV感染的關(guān)系。
　　方法:
　　1、

3、標(biāo)本收集
　　收集河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院2009年1月至2014年5月間符合條件的食管鱗狀細(xì)胞癌（原發(fā)性鱗狀細(xì)胞癌，手術(shù)前未經(jīng)過(guò)放化療）的石蠟組織，共150例。收集臨床病理資料，包括年齡，性別，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況和癌組織分化程度。
　　2、檢測(cè)病毒DNA
　　將石蠟組織切成薄片，使用石蠟組織DNA提取盒提取組織DNA。
　　以HPV L1基因MY09/MY11為引物，用PCR方法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組與陽(yáng)性對(duì)照組中HPV L1基

4、因的存在。使用beita-actin作為內(nèi)參，使用三蒸水代替引物完成PCR反應(yīng)做為陰性對(duì)照，使用確診HPV陽(yáng)性的宮頸癌石蠟組織提取的DNA作為陽(yáng)性對(duì)照。
　　3、檢測(cè)Fas/FasL蛋白表達(dá)
　　應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)食管鱗狀細(xì)胞癌及癌旁正常組織中Fas/FasL蛋白表達(dá)情況，F(xiàn)as/FasL蛋白陽(yáng)性反應(yīng)主要定位于細(xì)胞膜，少量位于細(xì)胞漿。
　　4、統(tǒng)計(jì)分析所有數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件，應(yīng)用X2檢驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處

5、理及相關(guān)分析。
　　結(jié)果:
　　1、食管鱗狀細(xì)胞癌HPV檢測(cè)結(jié)果
　　PCR結(jié)果顯示，150例標(biāo)本中51例HPV檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性，感染率34.0％。
　　2、食管鱗狀細(xì)胞癌Fas/FasL蛋白表達(dá)結(jié)果
　　免疫組化結(jié)果顯示，食管鱗狀細(xì)胞癌組織Fas蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為59.3％，明顯低于癌旁組織94.7％(P＜0.05)。食管鱗狀細(xì)胞癌組織FasL蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為76.0％，明顯高于癌旁組織44.7％(P＜0.05

6、)。
　　3、食管鱗狀細(xì)胞癌HPV感染與Fas/FasL蛋白表達(dá)的關(guān)系
　　HPV陽(yáng)性的癌組織Fas蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為25.5％，明顯低于HPV陰性的癌組織76.8％; HPV陽(yáng)性的癌旁組織Fas蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為86.3％，也低于HPV陰性的癌旁組織99.0％(P＜0.05)。
　　HPV陽(yáng)性的癌組織FasL蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為56.9％，明顯低于HPV陰性的癌組織85.9％(P＜0.05);HPV陽(yáng)性的癌旁組織FasL蛋白

7、陽(yáng)性表達(dá)率為41.2％與HPV陰性的癌旁組織46.5％之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　4、HPV與臨床病理特征的關(guān)系
　　HPV陽(yáng)性癌組織低分化鱗癌占43.1％，明顯高于HPV陰性的癌組織22.2％(P＜0.05);HPV陽(yáng)性的癌組織高中分化鱗癌占46.9％，明顯低于HPV陰性癌組織77.8％(P＜0.05);HPV感染與患者性別，年齡以及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)相關(guān)關(guān)系(P＞0.05)。
　　5、Fas/FasL蛋白

8、表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系
　　低分化癌組織Fas蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為43.2％，明顯低于高中分化癌組織66.0％(P＜0.05);Fas蛋白表達(dá)與患者性別，年齡以及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)相關(guān)關(guān)系(P＞0.05)。
　　低分化癌組織FasL蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為61.4％，明顯低于高中分化癌組織82.1％;62歲以上（包括62歲）患者癌組織FasL蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為65.8％，明顯低于62歲以下患者87.3％(P＜0.05);FasL蛋白表達(dá)與

9、患者性別，有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)相關(guān)關(guān)系（P＞0.05）。
　　6、HPV，F(xiàn)as/FasL蛋白表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系
　　HPV陽(yáng)性的癌組織中:62歲以上（包括62歲）患者Fas蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為13.8％，明顯低于62歲以下患者40.9％;62歲以上患者（包括62歲）FasL蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為41.4％，明顯低于62歲以下患者77.3％(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、本組食管鱗狀細(xì)胞癌HPV的感染率為34.0

10、％，HPV陽(yáng)性的癌組織低分化鱗癌增多，提示HPV與腫瘤分化存在相關(guān)關(guān)系。
　　2、食管鱗狀細(xì)胞癌組織中，F(xiàn)as蛋白表達(dá)降低，而FasL蛋白表達(dá)升高，提示Fas/FasL蛋白表達(dá)異常參與了食管鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生。
　　3、HPV感染可進(jìn)一步干擾Fas/FasL蛋白表達(dá)，提示HPV通過(guò)Fas/FasL凋亡途徑，在食管鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生中發(fā)揮一定作用。
　　4、HPV對(duì)Fas/FasL蛋白的影響在年老患者更顯著，提示HPV感染對(duì)