人食管鱗狀細胞癌Fas-FasL蛋白表達與人乳頭瘤病毒的關系.pdf

1、目的:食管癌(Esophageal Carcinoma，EC)是一種常見的消化道惡性腫瘤，在世界范圍腫瘤致死疾病中位居第6位。我國處于食管癌高發(fā)帶上，發(fā)病率最高的是河北省與河南省。食管鱗狀細胞癌占所有食管癌的90％，其發(fā)病原因尚未闡明，營養(yǎng)不良、吸煙、飲酒以及過熱飲食等環(huán)境因素都與其密切相關。人乳頭瘤病毒（Human Papillomavirus，HPV）是一種雙鏈環(huán)形DNA病毒，可以感染上皮組織，包括口腔食管組織及肛門生殖器官。最近有

2、相關報道稱，HPV感染有可能是食管鱗狀細胞癌的誘因之一。現已被證明HPV會抑制宮頸鱗狀細胞Fas/FasL凋亡途徑，誘發(fā)癌變，而其在食管鱗狀細胞癌中的作用尚未明確。為進一步明確HPV在食管鱗狀細胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用，本研究首先要明確我省食管鱗狀細胞癌中HPV的感染率以及Fas/FasL蛋白的表達情況，分析HPV感染與Fas/FasL蛋白表達的關系，希望從細胞凋亡方面揭示食管鱗狀細胞癌與HPV感染的關系。
　　方法:
　　1、

3、標本收集
　　收集河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院2009年1月至2014年5月間符合條件的食管鱗狀細胞癌（原發(fā)性鱗狀細胞癌，手術前未經過放化療）的石蠟組織，共150例。收集臨床病理資料，包括年齡，性別，淋巴結轉移情況和癌組織分化程度。
　　2、檢測病毒DNA
　　將石蠟組織切成薄片，使用石蠟組織DNA提取盒提取組織DNA。
　　以HPV L1基因MY09/MY11為引物，用PCR方法檢測各實驗組與陽性對照組中HPV L1基

4、因的存在。使用beita-actin作為內參，使用三蒸水代替引物完成PCR反應做為陰性對照，使用確診HPV陽性的宮頸癌石蠟組織提取的DNA作為陽性對照。
　　3、檢測Fas/FasL蛋白表達
　　應用免疫組化SP法檢測食管鱗狀細胞癌及癌旁正常組織中Fas/FasL蛋白表達情況，Fas/FasL蛋白陽性反應主要定位于細胞膜，少量位于細胞漿。
　　4、統(tǒng)計分析所有數據采用SPSS19.0軟件，應用X2檢驗對數據進行統(tǒng)計學處

5、理及相關分析。
　　結果:
　　1、食管鱗狀細胞癌HPV檢測結果
　　PCR結果顯示，150例標本中51例HPV檢測結果陽性，感染率34.0％。
　　2、食管鱗狀細胞癌Fas/FasL蛋白表達結果
　　免疫組化結果顯示，食管鱗狀細胞癌組織Fas蛋白陽性表達率為59.3％，明顯低于癌旁組織94.7％(P＜0.05)。食管鱗狀細胞癌組織FasL蛋白陽性表達率為76.0％，明顯高于癌旁組織44.7％(P＜0.05

6、)。
　　3、食管鱗狀細胞癌HPV感染與Fas/FasL蛋白表達的關系
　　HPV陽性的癌組織Fas蛋白陽性表達率為25.5％，明顯低于HPV陰性的癌組織76.8％; HPV陽性的癌旁組織Fas蛋白陽性表達率為86.3％，也低于HPV陰性的癌旁組織99.0％(P＜0.05)。
　　HPV陽性的癌組織FasL蛋白陽性表達率為56.9％，明顯低于HPV陰性的癌組織85.9％(P＜0.05);HPV陽性的癌旁組織FasL蛋白

7、陽性表達率為41.2％與HPV陰性的癌旁組織46.5％之間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　4、HPV與臨床病理特征的關系
　　HPV陽性癌組織低分化鱗癌占43.1％，明顯高于HPV陰性的癌組織22.2％(P＜0.05);HPV陽性的癌組織高中分化鱗癌占46.9％，明顯低于HPV陰性癌組織77.8％(P＜0.05);HPV感染與患者性別，年齡以及有無淋巴結轉移無相關關系(P＞0.05)。
　　5、Fas/FasL蛋白

8、表達與臨床病理特征的關系
　　低分化癌組織Fas蛋白陽性表達率為43.2％，明顯低于高中分化癌組織66.0％(P＜0.05);Fas蛋白表達與患者性別，年齡以及有無淋巴結轉移無相關關系(P＞0.05)。
　　低分化癌組織FasL蛋白陽性表達率為61.4％，明顯低于高中分化癌組織82.1％;62歲以上（包括62歲）患者癌組織FasL蛋白陽性表達率為65.8％，明顯低于62歲以下患者87.3％(P＜0.05);FasL蛋白表達與

9、患者性別，有無淋巴結轉移無相關關系（P＞0.05）。
　　6、HPV，Fas/FasL蛋白表達與臨床病理特征的關系
　　HPV陽性的癌組織中:62歲以上（包括62歲）患者Fas蛋白陽性表達率為13.8％，明顯低于62歲以下患者40.9％;62歲以上患者（包括62歲）FasL蛋白陽性表達率為41.4％，明顯低于62歲以下患者77.3％(P＜0.05)。
　　結論:
　　1、本組食管鱗狀細胞癌HPV的感染率為34.0

10、％，HPV陽性的癌組織低分化鱗癌增多，提示HPV與腫瘤分化存在相關關系。
　　2、食管鱗狀細胞癌組織中，Fas蛋白表達降低，而FasL蛋白表達升高，提示Fas/FasL蛋白表達異常參與了食管鱗狀細胞癌的發(fā)生。
　　3、HPV感染可進一步干擾Fas/FasL蛋白表達，提示HPV通過Fas/FasL凋亡途徑，在食管鱗狀細胞癌的發(fā)生中發(fā)揮一定作用。
　　4、HPV對Fas/FasL蛋白的影響在年老患者更顯著，提示HPV感染對