人乳頭瘤病毒感染與DAN異常甲基化在食管鱗狀細(xì)胞癌中的研究.pdf

1、背景和目的：
　　人乳頭瘤病毒（Human papillomavirus,HPV）感染可能是食管鱗狀細(xì)胞癌（Esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）的危險(xiǎn)因素之一。而在食管鱗癌病人中，HPV的感染是否與 DNA異常甲基化存在相關(guān)關(guān)系目前仍不清楚。本實(shí)驗(yàn)擬研究潮汕地區(qū)食管鱗狀細(xì)胞癌病人中人乳頭瘤病毒及其亞型HPV16、HPV18的感染情況和該病毒感染對(duì)DNA異常甲基的影響。
　　材料和方

2、法：
　　本實(shí)驗(yàn)研究的對(duì)象為2013年至2014年間入院汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤并經(jīng)病理確診的食管鱗狀細(xì)胞癌腫瘤患者，共包括了88例食管鱗癌患者的手術(shù)切除標(biāo)本，其中79例腫瘤組織標(biāo)本有對(duì)應(yīng)的癌旁正常組織。實(shí)驗(yàn)采用了巢式PCR的方法對(duì)人乳頭瘤病毒HPV及其亞型HPV16和HPV18的感染情況進(jìn)行了測(cè)定。同對(duì)收集的這88例食管癌腫瘤病人的癌組織及對(duì)應(yīng)的79例癌旁正常組織進(jìn)行了腫瘤相關(guān)基因/位點(diǎn)甲基化狀態(tài)的檢測(cè)，采用的是甲基化特異性PCR

3、的方法。本課題進(jìn)行甲基化研究的基因/位點(diǎn)包括了MINT1、MINT2、MINT25、MLH1、RASSF1A和MGMT。
　　結(jié)果：
　　人乳頭瘤病毒HPV通用引物PGMY09/11聯(lián)合通用引物GP5+/6+巢式PCR方法檢測(cè)出該組食管鱗癌腫瘤病人中有55例存在HPV感染陽(yáng)性，陽(yáng)性感染率為62.5％。然后對(duì)這些感染陽(yáng)性的患者進(jìn)一步進(jìn)行HPV16、HPV18亞型感染情況的檢測(cè)，結(jié)果顯示，有25例病人存在HPV16亞型的感染，有

4、6例病人存在HPV18亞型的感染，總感染率分別為28.14%和6.82%；在這些進(jìn)行亞型檢測(cè)的病人中，有3例病人出現(xiàn)了HPV16和HPV18共同感染的情況。在關(guān)于腫瘤相關(guān)基因甲基化的研究，腫瘤相關(guān)基因MINT1、MINT2、MINT25、MLH1、RASSF1A和MGMT在食管鱗癌腫瘤組織中的甲基化陽(yáng)性率分別為15.91%、20.45%、6.82%、20.45%、13.64%和15.91%，而對(duì)應(yīng)的在79例癌旁正常組織中其甲基化陽(yáng)性率則

5、降為0、3.80%、1.27%、3.80%、8.86%和8.86%。其中MINT2、MINT25、MGMT和RASSF1A的甲基化陽(yáng)性率在食管鱗癌和癌旁組織中存在有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，癌組織的甲基化陽(yáng)性率高于其對(duì)應(yīng)的癌旁組織。根據(jù)這組腫瘤相關(guān)基因的甲基化改變情況，將這些腫瘤病人分為甲基化改變-陰性、低、高組。對(duì)比各組HPV及其亞型的感染情況可發(fā)現(xiàn)，HPV16亞型的感染與DNA異常甲基化增高有關(guān)。
　　結(jié)論：
　　食管鱗癌病人中異常的