IDO在食管鱗狀細胞癌中的表達.pdf

1、目的
　　食管癌鱗狀細胞癌，是一種具有高度侵襲性、致命性的全球性惡性腫瘤。在過去的三十年時間里，食管鱗狀細胞癌患者的長期生存率并沒有獲得實質性的提高，食管鱗狀細胞癌預后仍然是所有癌癥里面期望生命值最差的癌癥。
　　研究表明，腫瘤細胞的生長、侵襲以及轉移不僅取決于腫瘤細胞本身，而且與他們周圍的微環(huán)境密切相關。已經有實驗證實腫瘤微環(huán)境間充質細胞通過釋放生長因子、免疫調節(jié)分子以及建立新生血管及產生重塑酶來抑制機體免疫、促進腫瘤細胞

2、的生長和發(fā)展。
　　吲哚胺2，3-雙加氧酶(IDO)是一種色氨酸降解的限速酶，目前被認為是一種新的免疫抑制因子廣泛存在于各種類型的人類癌癥中，從而引起了醫(yī)學研究領域的廣泛關注。吲哚胺2，3雙加氧酶(IDO)蛋白合成的增加可抑制宿主自身的抗腫瘤免疫系統(tǒng)，進而有助于癌細胞逃脫宿主免疫系統(tǒng)的攻擊。事實上，我們以前的研究中已經發(fā)現(xiàn)間充質反應在食管鱗狀細胞癌腫瘤微環(huán)境中的作用，其中包括腫瘤相關成纖維細胞的顯著激活、微血管以及炎性細胞因子的生

3、產形成增加等相關表現(xiàn)。在不同癌癥中包括食管鱗狀細胞癌，都可發(fā)現(xiàn)一個顯著的間充質反應，即吲哚胺2，3雙加氧酶(IDO)的高表達。因此，我們大膽的推測高反應性的腫瘤相關成纖維細胞和微血管內皮細胞通過在腫瘤間充質中刺激釋放吲哚胺2，3雙加氧酶(IDO)，從而共同參與腫瘤免疫抑制微環(huán)境的形成。在本課題中，我們研究吲哚胺2，3雙加氧酶(IDO)在食管鱗狀細胞癌腫瘤微環(huán)境在腫瘤相關成纖維細胞和微血管內皮細胞上的表達。
　　實驗方法:
　

4、　收集食管鱗狀細胞癌(ESCC)組織50例，正常食管組織（癌旁組織）10例，應用免疫組化單染和雙染技術來檢測腫瘤相關成纖維細胞(TAFs)、微血管和IDO在食管鱗狀細胞癌微環(huán)境（間充質）中的表達;免疫組化雙染來界定IDO和增值指數(shù)在食管鱗狀細胞癌微環(huán)境（間充質）成纖維細胞(TAFs)和微血管上的表達。兩組間統(tǒng)計分析采用Mann-whitney檢驗，應用SPSS21.0軟件處理數(shù)據(jù)。檢驗水準設定為α=0.05。
　　結果:
　

5、　(1)在食管鱗狀細胞癌的間充質中我們能夠觀察到SMAα陽性的腫瘤相關成纖維細胞。腫瘤相關成纖維細胞分布于整個腫瘤間充質中。半定量分級法判定SMAα陽性腫瘤相關成纖維細胞表達含量，從而界定TAFs在腫瘤微環(huán)境中得表達密度，與正常組織相比，食管鱗狀細胞癌微環(huán)境中的SMAα陽性腫瘤相關成纖維細胞表達密度顯著增加(P＜0.05)。
　　(2)通過不同組織中CD34標記的腫瘤相關微血管表達，我們觀察到，與正常組織相比ESCC腫瘤間充質中有

6、更高密度的微血管。統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示在ESCC腫瘤微環(huán)境中有顯著增加的微血管密度(P＜0.05)。
　　(3)與正常組織相比，食管鱗狀細胞癌腫瘤微環(huán)境（間充質）中可以觀察到高表達的IDO。從形態(tài)上來看，多數(shù)高表達IDO的細胞可以被認定為TAFs以及微血管。半定量分級法判定IDO表達含量，食管鱗狀細胞癌間充質中TAFs及微血管中IDO陽性表達量均顯著高于正常食管組織間充質(P＜0.05)。
　　(4)采用免疫組化雙染的技術對ESCC

7、微環(huán)境中TAFs和微血管的增殖活動進行效果評價。結果顯示增殖細胞核抗原的免疫反應可以在SMAα陽性的TAFs中和CD34陽性的微血管內皮細胞上頻繁的觀察到，可有效評價這兩種細胞的增殖活性。同樣采用免疫組化雙染方法對IDO在ESCC腫瘤間充質TAFs和微血管內皮細胞中的表達進行進一步研究。結果顯示在ESCC腫瘤間充質中IDO的陽性反應經常與SMAα陽性的TAFs和CD34陽性的微血管內皮細胞共同表達。
　　結論:
　　ESCC