體外培養(yǎng)大鼠胚胎神經(jīng)干細(xì)胞的研究.pdf

1、用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在DMEM/F12無血清培養(yǎng)液中培養(yǎng)大鼠胚胎神經(jīng)干細(xì)胞,觀察了不同因素對(duì)體外培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞的影響.結(jié)果如下:在DMEM/F12為基礎(chǔ)的無血清培養(yǎng)液中神經(jīng)干細(xì)胞能夠懸浮或貼壁生長(zhǎng),并且傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)速度比原代細(xì)胞快;在有限稀釋法克隆神經(jīng)干細(xì)胞時(shí),培養(yǎng)液全更換處理組所形成的神經(jīng)干細(xì)胞克隆數(shù)少于培養(yǎng)液更換一半處理組,軟瓊脂法干細(xì)胞克隆時(shí),所形成的干細(xì)胞克隆數(shù)多于更換全部培養(yǎng)液處理組、但少于更換一半培養(yǎng)液處理組;接種密度在1×10

2、<'4>個(gè)細(xì)胞/ml以上的培養(yǎng)液中形成的干細(xì)胞克隆數(shù)多于1×10<'3>個(gè)細(xì)胞/ml的培養(yǎng)液,接種密度為1×10<'2>個(gè)細(xì)胞/ml的培養(yǎng)液中沒有形成干細(xì)胞克隆;在培養(yǎng)液中分別或同時(shí)添加bFGF和EGF,均能夠有效的使大鼠胚胎神經(jīng)干細(xì)胞生長(zhǎng)增殖促進(jìn)作用,濃度為20ng/ml的效應(yīng)最好,分別添加bFGF和EGF時(shí),bFGF的效果優(yōu)于EGF;添加脂類物質(zhì)會(huì)使神經(jīng)干細(xì)胞的生長(zhǎng)速度加快2.5倍;對(duì)其神經(jīng)干細(xì)胞進(jìn)行核型分析的結(jié)果表明,在體外條件下