胚胎神經干細胞和聽囊細胞體外分化的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：研究胚胎神經干細胞和聽囊細胞體外分化為毛細胞的潛能；探討胚胎神經干細胞在內耳再生研究領域的價值。
　　 方法：分離孕9.5-10.5天C5786/L小鼠胚胎的后腦區(qū)域的神經管組織和聽囊組織，采用無血清培養(yǎng)，進行體外培養(yǎng)、擴增，并通過免疫熒光化學染色（巢蛋白）進行鑒定。取傳至第4代神經干細胞和聽囊細胞，接種于蓋玻片上。添加血清培養(yǎng)基，培養(yǎng)15天后行免疫熒光檢測，與RT-PCR檢測。觀察神經干細胞和聽囊細胞的體外分化特點。

2、r>　　 結果：采用無血清培養(yǎng)法成功地培養(yǎng)出胚胎神經干細胞球和聽囊細胞球，采用神經球分析法收集細胞球進行純化與傳代，免疫熒光檢測示：來源于神經管和聽囊的細胞球巢蛋白（nestin）表達陽性，證實其都具有神經干細胞的特點。添加含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)15天后，免疫熒光檢測證實所獲得的神經干細胞和聽囊細胞均可以在體外分化為表達毛細胞標記物MyosinⅦa的細胞。
　　 結論：胚胎神經干細胞和聽囊細胞能夠在體外培養(yǎng)的條件下分化為毛細胞樣細胞

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