氯化鈷誘導PC12細胞凋亡的分子機制及相關信號轉導途徑.pdf

1、山東大學碩士學位論文氯化鈷誘導PC12細胞凋亡的分子機制及相關信號轉導途徑姓名：曾季平申請學位級別：碩士專業(yè)：動物學指導教師：王金星2002.5.11山東大學碩士學位論文導的P C I 2 細胞凋亡：( 1 ) c a s p s e 一3 的多肽底物A c - D E v D 一7 A M C 隨P C I 2 細胞中c o c l 。的加入而被降解并與C o C l 。誘導的時間有關；( 2 ) P C I 2 細胞內c a s p

2、 a s e 一3的底物p o l y 一( A D P - r i b o s e ) p o l y m e r a s e ( P ／R P ) 被降解為8 5 K D a 的片斷并與c o c l 。誘導P C I 2 細胞的時間有關；( 3 ) c a s p a s e 一3 的特異性抑制劑Z - D E V D —F M K和A c - D E V D —C H O 可抑制C 0 9 1 。誘導的P C I 2 細胞凋亡。

3、實驗i 丕i i [ N ，p 3 8M A P K 參與了C o C l 。誘導的P C I 2 細胞凋亡過程：( 1 ) 在凋亡過程中，p 3 8M A P K 被激活，即其磷酸化程度上升；( 2 ) p 3 8M A P K 的抑制劑S B 2 0 3 5 8 0 可部分抑制C o C l 。誘導的P C I 2 細胞凋亡；( 3 ) p 3 8M d i P K 的抑制劑S B 2 0 3 5 8 0 可抑制C o C l 。誘

4、導激發(fā)的c a s p a s e - 3 活性。實驗也證明，在P C I 2 細胞中，H S P 9 0 蛋白的表達隨C o C l 。誘導時間的增長而下降，H S P 9 0 的特異性抑制劑g e l d a n a m y c i n ( G A ) 可使C o C l 。誘導的細胞凋亡趨勢增強，而同時S B 2 0 3 5 8 0 可使H S P 9 0 蛋白的表達上升，由此認為C o C l ?？赡苁峭ㄟ^激活p 3 8M A

5、P K 使H S P 9 0 蛋白的表達下降，從而降低了P C I 2 細胞的穩(wěn)定性而誘導其凋亡。但這條信號轉導途徑還需進一步研究。以上釃結果表明，氯化鈷誘導的P C I 2 細胞在體外能很好地模擬缺氧條件j f下神經細胞的反應。I 構建這一模型十分簡單，因此它作為研究缺氧誘導神經細胞凋亡的體外模型有很大的應用價值。同時我們在實驗中發(fā)現(xiàn)，桿狀病毒p 3 5 基因和c a s p a s e s 蛋白酶家族抑制劑能有效抑制C 0 0 1

6、z 誘導的P C I 2 細胞凋亡，H S P 9 0 蛋白在C o C l ：誘導的P C I 2 細胞凋亡過程中表達發(fā)生變化，p 3 8 M A P K的選擇性抑制劑S B 2 0 3 5 8 0 可以影響H S P 9 0 的表達等。這些結果為以后進一步研究與缺氧有關的各種神經疾病的治療提供了新的思路。因此進一步研究、C o C l 。誘導的P C I 2 細胞凋亡的分子機制和信號轉導途徑是十分必要的。*關鍵詞：氯化鈷；P C I