孤啡肽對大鼠背根神經節(jié)神經元膜電位的影響及離子機制.pdf

1、孤啡肽(orphaninOF,OFQ)是近幾年來新發(fā)現的一種內源性阿片肽，廣泛分布于中樞和外周組織，參與機體的多種生理活動。背根神經節(jié)(dorsalrootganglion，DRG)是各種軀體感覺(也包括內臟感覺)向中樞傳遞的初級感覺神經元集中的部位，DRG神經元是一類具有假單極形態(tài)特征的初級感覺神經元，其對各種感覺傳入信息具有一定的整合作用。目前OFQ對中樞神經系統的影響已有報道，但是在外周OFQ對DRG神經元膜的作用及對初級感覺尤以

2、痛覺傳入信息的調制作用國內外尚未見報道。本文在離體的Wistar大鼠DRG標本上，用細胞內微電極記錄技術研究OFQ對背根神經節(jié)神經元膜的作用及作用機制。 研究方法：出生后2～3周的幼年Wistar大鼠，在乙醚麻醉下行椎板切除術，分離L4-L5的脊神經根。將標本用細鋼針固定于記錄浴槽底部之硅膠片上，BSS灌流標本，玻璃微電極行細胞內穿刺。應用細胞內微電極記錄技術，研究初級感覺神經元上是否存在OFQ受體及OFQ對神經元膜電位的影響，

3、并用離子置代及通道阻斷劑對其作用機制進行研究。 結果：受檢的271個神經元，靜息膜電位-45.22±7.63mV(n=271)，當加3×10-7～10-10mol/LOFQ時可觀察到如下三種膜電位變化：(1)超極化反應；(2)去極化反應；(3)雙相反應。實驗中還觀察到膜電位無反應的現象，其未列入受檢細胞個數中。用Nphe(3×10-7～10-8mol/L)灌流標本，基本可以阻斷OFQ引起的膜電位變化。用含阿片受體非選擇性阻斷劑納

4、絡酮(Naloxone)的BSS灌流標本，對OFQ引起的去極化無影響，但可阻斷OFQ引起的超極化反應。BSS中NaCl以氯化膽堿(cholinechloride，CH-CL)置代，對OFQ引起的膜電位無影響。用含氯化鋇(bariumchloride，BaCl2)的BSS灌流時能使OFQ去極化反應幅值減少和超極化反應幅值無變化。用含四乙基碘化銨(etraethylammoniumchloride，TEA)的BSS灌流時能使OFQ引起的去極

5、化和超極化幅值減小。用含4-氨基吡啶(4-Aminopyridine，4-AP)，格列本脲(Glibenclamide，GLIB)及蜂毒(Apamin)的BSS灌流標本，對OFQ引起的膜電位改變無影響。分別用含氯化鎘(cadmiumchloride，CdCl2)，尼莫地平(Nimodipine)，去鈣(0mmol/L)和高鈣(20mmol/L)對OFQ引起的膜電位變化均無影響。 結論：OFQ本身就是阿片肽家族中的一員，其受體后作

6、用也與阿片系統相似，能夠抑制腺苷酸環(huán)化酶，增加鉀通道電導，降低鈣通道電導。目前國內外很多資料表明，OFQ在痛和鎮(zhèn)痛方面具有重要作用，它的研究已經成為神經科學研究的熱點之一。本實驗應用細胞內微電極記錄技術研究，結果顯示： 1.DRG標本上存在ORL1受體，OFQ與ORL1受體結合從而調制DRG神經元膜電位。 2.OFQ引起DRG神經元膜電位的多樣性變化，產生去極化反應，超極化反應和雙相反應。 3.OFQ引起的DRG