去甲腎上腺毒對培養(yǎng)的背根神經節(jié)神經元P物質釋放的調節(jié)作用.pdf

1、在組織損傷或炎癥狀態(tài)下，去甲腎上腺素能神經的可塑性變化會影響其對抗傷害性刺激的效能。在生理和病理條件下，去甲腎上腺素(noradrenaline，NA)是激活腎上腺素能受體的關鍵神經遞質。有趣的是，α1-腎上腺素能受體和α2-腎上腺素能受體在背根神經節(jié)（dorsalrootganglion,DRG）初級傳入神經元都有表達并且調節(jié)神經源性炎癥和傷害性刺激反應。在體外培養(yǎng)的大鼠DRG神經元中，NA可以通過激活α1-腎上腺素能受體而非α2-腎

2、上腺素能受體來抑制熱激活的K+通道電流。NA的釋放可參與調節(jié)傷害感受性刺激。P物質(substanceP，SP)是一個含11個氨基酸的神經肽，存在于支配周圍組織的感覺神經內，可參與炎癥反應和傷害感受性刺激的調節(jié)。對傷害感受性刺激作出反應的DRG初級傳入神經元具有表達SP的特征。SP的釋放可激活上行感覺神經元將痛覺信號從周圍神經系統(peripheralnervoussystem，PNS)傳遞到中樞神經系統（centralnervouss

3、ystem，CNS）。SP從周圍神經末梢的釋放會引起神經源性炎癥。很多因素或物質會引起SP釋放而導致神經源性炎癥。有實驗證實α1-腎上腺素能受體激動劑苯腎上腺素會引起辣椒素(capsaicin，CAP)敏感感覺神經末梢釋放P物質。由注射CAP引起的神經源性炎癥和疼痛取決于對交感傳出神經釋放NA的反應。激活或抑制α-腎上腺素能受體是否會影響DRG神經元SP的表達和釋放目前仍不清楚。本研究建立胎鼠DRG神經元分散培養(yǎng)的模型，用逆轉錄-聚合酶

4、鏈反應(reversetranscription-polymerasechainreaction，RT-PCR)分析技術、蛋白質印跡法(Westernblotassay)、免疫熒光雙標技術和酶聯免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)，研究α-腎上腺素能受體激動劑NA和α1-腎上腺素能受體拮抗劑哌唑嗪和α2-腎上腺素能受體拮抗劑育亨賓對體外培養(yǎng)的DRG神經元SP的表達和釋放的影響作用。本課

5、題的研究結果如下:(1)RT-PCR分析結果顯示，培養(yǎng)液中加入α-腎上腺素能受體激動劑NA、α1-腎上腺素能受體拮抗劑哌唑嗪和α2-腎上腺素能受體拮抗劑育亨賓對DRG神經元編碼SP的前速激肽原(preprotachykinin，PPT)mRNA的表達水平沒有顯著影響。(2)蛋白質印跡法分析結果顯示，α-腎上腺素能受體激動劑NA、α1-腎上腺素能受體拮抗劑哌唑嗪和α2-腎上腺素能受體拮抗劑育亨賓對DRG神經元SP的表達水平沒有顯著影響。(

6、3)免疫熒光雙標技術研究結果顯示，α-腎上腺素能受體激動劑NA、α1-腎上腺素能受體拮抗劑哌唑嗪和(α2-腎上腺素能受體拮抗劑育亨賓對表達SP的神經元比率沒有顯著影響。(4)ELISA分析結果顯示，α-腎上腺素能受體激動劑NA、α1-腎上腺素能受體拮抗劑哌唑嚷和α2-腎上腺素能受體拮抗劑育亨賓對SP的基礎釋放量沒有顯著影響;而NA可增加CAP誘發(fā)的SP釋放量，哌唑嗪預處理能夠減少由NA導致的CAP誘發(fā)的SP釋放量的增加，育亨賓對NA誘導