基于量子點的α1腎上腺素受體熒光探針的設計、合成及其在活細胞中的初步應用.pdf

1、本論文主要分為四部分：Ⅰ．緒論。Ⅱ．喹唑啉-量子點熒光探針的合成與表征。Ⅲ.去氧腎上腺素-量子點熒光探針的合成與表征。Ⅳ.量子點熒光探針在活細胞中的初步應用。
　　 Ⅰ．在論文的第一部分，首先對單細胞單分子研究的意義、方法和進展做了簡單的介紹。其次對α1腎上腺素受體及其研究進展以及發(fā)展最好，最具前途的熒光分析方法進行了綜述，并對熒光分析法中常用的傳統(tǒng)有機染料、綠色熒光蛋白和新型半導體納米顆粒-量子點進行了對比綜述。介紹了量子點新

2、型探針在生命科學中的應用，以及常用的熒光檢測技術，重點介紹了全內(nèi)反射熒光顯微術。
　　 Ⅱ．論文的第二部分針對α1腎上腺素受體拮抗劑喹唑啉類藥物的特點，設計并合成了可以與量子點進行連接并形成特異性親和α1腎上腺素受體的熒光探針。為了使連接后的藥物小分子更接近其本來的動力學特性，減少量子點帶來的空間位阻，我們將藥物小分子和量子點之間增加了一條PEG連接鏈。合成部分則分為N-羥基琥珀酰亞胺生物素酯的合成，2-(1-哌嗪)-4-氨基-

3、6，7-二甲氧基喹唑啉的合成，功能化聚乙二醇H2N-PEG-COOH的合成，2-（1-哌嗪）-4-氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉的生物素化以及喹唑啉-量子點探針的合成等六部分，最后的合成產(chǎn)物使用1H NMR和基質輔助-激光解吸飛行時間質譜來確認其結構。
　　 Ⅲ．論文的第三部分是使用α1腎上腺素受體激動劑去氧腎上腺素對量子點進行修飾，因為其結構與拮抗劑相比具有較活潑的氨基，與PEG的連接基團也不相同，所以合成的路線和方法也不同。實

4、驗首先對去氧腎上腺素分子中的活潑氨基進行了保護，保護試劑為常用的氨基保護試劑——二碳酸二叔丁酯，該保護基團在合成后使用三氟乙酸除去，副產(chǎn)物為CO2，不會對合成產(chǎn)生新的雜質。合成產(chǎn)物使用1H NMR和基質輔助-激光解吸飛行時間質譜來確認其結構。
　　 Ⅳ.最后一部分結合全內(nèi)反射熒光顯微鏡對合成的喹唑啉-量子點探針在活細胞中的應用做了初步地探討。結果顯示，表達α1腎上腺素受體的細胞表面親和了大量的熒光探針量子點，而沒有表達α1腎上腺