姜黃素對非酒精性脂肪性肝病大鼠Visfatin、鋅-α2糖蛋白作用影響的研究.pdf

1、目的:隨著現(xiàn)代生活節(jié)奏加快，人們沉溺于不健康飲食及不良生活習(xí)慣，NAFLD已成為慢性肝病的重要病因。NAFLD發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，目前尚不完全清楚。研究發(fā)現(xiàn)多種因素促使NAFLD的發(fā)生，包括胰島素抵抗、脂質(zhì)代謝異常、氧化應(yīng)激、凋亡易感性增加等。但以上因素仍不能完全解釋NAFLD發(fā)病機(jī)制，能否有效建立NAFLD動物模型，從而在動物模型的基礎(chǔ)上進(jìn)行研究？Visfatin在NAFLD發(fā)病過程中作用尚有爭議。研究發(fā)現(xiàn)Visfatin可誘使肝細(xì)胞脂肪變

2、性，促進(jìn)NAFLD的發(fā)生。ZAG通過調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)代謝在NAFLD發(fā)病過程中發(fā)揮保護(hù)作用。能否在動物NAFLD模型基礎(chǔ)上研究Visfatin及ZAG在NAFLD中的作用？姜黃是常見中藥，有行氣活血及通經(jīng)止痛的作用。最近的研究提示其有抗氧化、清除氧自由基、抗炎等作用。姜黃素是姜黃最重要的活性成分，研究顯示其對NAFLD有一定的治療作用，但其具體作用機(jī)制尚不清楚。能否在動物NAFLD模型基礎(chǔ)上，觀察姜黃素治療NAFLD效果？姜黃素在NAFLD

3、防護(hù)過程中機(jī)制？姜黃素療效是否與調(diào)節(jié)Visfatin和ZAG表達(dá)有關(guān)？研究發(fā)現(xiàn)姜黃素生物內(nèi)利用度較低。目前有多個研究使用不同劑量姜黃素對NAFLD有影響，但尚無不同劑量對比。已證實(shí)不同劑量姜黃素對潰瘍性結(jié)腸炎有不同影響，能否證明不同劑量姜黃素對NAFLD影響不同？
　　方法:選取56只SD雄性大鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周。隨機(jī)分為正常組(16只)和模型組(40只)，分別給予普通飼料和高脂飼料喂養(yǎng)，自由飲水。8周末處死正常組和模型組大鼠各8

4、只，取肝臟進(jìn)行病理學(xué)檢查。證實(shí)造非酒精性肝病動物模型成功后，將造模成功的大鼠（模型組）隨機(jī)分為4組（低劑量組、中劑量組、高劑量組、對照組），每組8只，繼續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)。低劑量組予以姜黃素50mg/kg/d灌胃;中劑量組予以姜黃素100mg/kg/d灌胃;高劑量組予以姜黃素200mg/kg/d灌胃;對照組予以等體積羧甲基纖維素鈉溶液灌胃，連續(xù)4周;正常組繼續(xù)普通飼料喂養(yǎng)，予以等體積羧甲基纖維素鈉溶液灌胃，連續(xù)4周。12周末禁食12h，處死

5、所有動物，心臟采血測生化指標(biāo)ALT、AST、TG、TC、FBG和FINS，并計(jì)算HOMA-IR。迅速切取大鼠肝組織，稱濕重，一部分肝組織制成石蠟切片后予以病理學(xué)檢查及免疫組化測Visfatin、ZAG表達(dá)，一部分液氮凍存后-80℃下保存予以RT-PCR檢測visfatin mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果:1.與正常組相比，模型組肝指數(shù)、血清ALT、AST、TG、TC、FINS、FBG和HOMA-IR均升高，兩組間的差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

6、＜0.01)。2.隨著高脂飼料喂養(yǎng)時間延長，兩階段模型組肝指數(shù)、血清ALT、AST、TG、TC、FINS、FBG和HOMA-IR呈升高趨勢(P＜0.05)。3.低、中、高劑量組較同時期模型組肝指數(shù)、血清ALT、AST、TG、TC、FINS、FBG和HOMA-IR降低(P＜0.05)，但高于正常對照組(P＜0.05)，除肝指數(shù)、TG、FINS、FBG，低中高劑量組間有明顯差異(P＜0.05)。4.與正常組相比，模型組肝組織Visfatin

7、表達(dá)增加(P＜0.01)，ZAG表達(dá)降低(P＜0.01)。5.隨著高脂飼料喂養(yǎng)時間延長，兩階段模型組肝組織Visfatin表達(dá)呈升高趨勢(P＜0.01)，ZAG表達(dá)呈降低趨勢(P＜0.01)。6.低中高劑量組較同期模型組肝組織Visfatin表達(dá)下降(P＜0.01)，ZAG表達(dá)增加(P＜0.05)，但沒有恢復(fù)正常(P＜0.05)，且低中高劑量組間有明顯差異(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1.通過高脂飲食喂養(yǎng)大鼠一定時間后，可成功建立

8、NAFLD模型，造模成功后大鼠可見高脂血癥、高胰島素血癥，肝臟可見明顯脂肪變、脂肪性肝炎改變;2.Visfatin可誘使肝細(xì)胞脂肪變性，促進(jìn)NAFLD的發(fā)生;ZAG通過調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)代謝在NAFLD發(fā)病過程中發(fā)揮保護(hù)作用;3.姜黃素處理后的NAFLD鼠體內(nèi)HOMA-IR、TG、TC的水平降低，伴血清ALT、AST的顯著下降和肝臟病理組織學(xué)的改善;4.姜黃素治療NAFLD的機(jī)制可能是通過調(diào)節(jié)肝臟Visfatin、ZAG水平(Visfatin