大花蕙蘭組織培養(yǎng)、多倍體誘導(dǎo)及共生真菌的研究.pdf

1、人們慣于將蘭花分為國蘭和“洋蘭”。洋蘭是指從國外引進(jìn)的品種,大花蕙蘭就是其中之一。大花蕙蘭具有重要的觀賞和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。目前國內(nèi)的大花蕙蘭生產(chǎn)所用種苗主要從國外進(jìn)口,價(jià)格較高,隨著人民生活水平提高,人們對(duì)蘭花的需求量將大幅度上升。目前,組織培養(yǎng)已成為大花蕙蘭繁殖的一條有效途徑。近來人們開始對(duì)洋蘭的育種進(jìn)行研究,旨在尋求優(yōu)良的品系,蘭花高價(jià)一般以色美優(yōu)雅、株奇為準(zhǔn)。多倍體育種能培育出花朵大、株奇的品種,一直是研究的熱點(diǎn)。大花蕙蘭共生真菌的研究

2、將為組織培養(yǎng)中提高植物成活率的這一關(guān)鍵問題奠定了一定的理論基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)大花蕙蘭組織培養(yǎng)的研究建立了完整的組培體系,對(duì)大花蕙蘭的多倍體育種、共生真菌的促生作用進(jìn)行了研究,主要結(jié)果如下:
　　1.以MS為基本培養(yǎng)基,運(yùn)用正交設(shè)計(jì)方法,利用植物組織、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),成功地建立了大花蕙蘭的組織培養(yǎng)快繁技術(shù)體系。實(shí)驗(yàn)以大花蕙蘭無菌苗假球莖為材料,誘導(dǎo)叢生芽。篩選出適宜誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+6.4 g·L-1瓊脂+0.5％AC+2.0 Mg

3、·L-16-BA+0.1 Mg·L-1NAA+30g·L-1蔗糖。待芽長(zhǎng)至2-3cM時(shí),轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基,得到適宜的生根培養(yǎng)基為MS+6.4g·L-1瓊脂+0.2 Mg·L-16-BA+0.5 Mg·L-1NAA+0.5 Mg·L-1ABT。根長(zhǎng)達(dá)到2-4cM時(shí)煉苗移栽,成活率可達(dá)95％。
　　2.秋水仙素可誘導(dǎo)植物產(chǎn)生多倍體植株但不同濃度的秋水仙素和不同時(shí)間的處理對(duì)大花蕙蘭的誘導(dǎo)率不同。本實(shí)驗(yàn)研究了秋水仙素不同濃度不同時(shí)間處理大花

4、蕙蘭無菌苗叢生芽的誘導(dǎo)效果,發(fā)現(xiàn)隨著處理時(shí)間和濃度的增加,叢生芽的死亡率增加,多倍體細(xì)胞誘導(dǎo)率在一定范圍內(nèi)隨處理時(shí)間和濃度增加升高,但濃度超過一定量誘導(dǎo)率則相反。以0.05％的秋水仙素處理24h多倍體細(xì)胞誘導(dǎo)率最佳,。活得的變異材料與正常二倍體相比,其葉片變粗、株高變矮、根長(zhǎng)變短、氣孔器變大,經(jīng)鑒定為多倍體。
　　3.植物和真菌之間存在共生關(guān)系,本實(shí)驗(yàn)通過將大花蕙蘭無菌組培苗和菌液的共培養(yǎng),確定了菌株MCG1213對(duì)大花蕙蘭的促生