利用組織培養(yǎng)誘導棗和酸棗多倍體研究.pdf

1、該試驗以二倍體冬棗(Z.jujuba cv.Dongzao)和酸棗(Ziziphus acidojujuba C.Y.Cheng et M.J.Liu)的二倍體組培苗為試材,以秋水仙堿為誘變劑,在組織培養(yǎng)條件下首次獲得了酸棗和冬棗的純合四倍體植株.并建立了適于棗組培苗組織培養(yǎng)誘變、純化、鑒定技術體系,同時以二倍體為對照,研究了變異株在形態(tài)學、細胞學等方面的變化.此外,還建立了棗和酸棗四倍體組培苗的快繁體系并對聚乙烯醇對組培苗抗玻璃化的作

2、用進行了較為系統(tǒng)的研究.主要研究結(jié)果如下:1不同誘變材料、不同處理方法對組培苗的誘變效果不同,以叢芽混培最高,依次為莖段浸泡、叢芽浸泡、莖段混培.2不同誘變材料、不同處理方法對組培苗的致死率不同.以莖段浸泡最高,依次為莖段混培、叢芽浸泡、叢芽混培.酸棗莖段在0.6％的秋水仙素溶液中浸泡處理6d,死亡率為66.70%;冬棗莖段為86.70%.酸棗莖段在100mg/L的秋水仙素培養(yǎng)基處理40d,死亡率為為30.00%;冬棗莖段在100mg/

3、L的秋水仙素培養(yǎng)基處理40d,死亡率為為70.00%.3將誘變處理的組培苗的莖段、叢芽進行4d的預培養(yǎng)、15d的暗培養(yǎng)以及在培養(yǎng)基中添加1.0%的二甲基亞砜均可有效提高誘變頻率;1.5g/L的活性炭可有效降低處理材料的褐化率.4在組織培養(yǎng)條件下,利用切割分離的方法對嵌合體進行純化.如此進行3-4次分離,對得到的四倍體誘導生根,檢測頂芽、側(cè)芽、根尖的染色體倍性,染色體數(shù)目均為48條,獲得了酸棗和冬棗的純合四倍體植株.5四倍體組培苗與二倍體

4、組培苗相比顯著變化為:葉片變大變厚、葉色變深、葉緣鋸齒增大、鋸齒數(shù)目減少,莖粗加粗、葉片氣孔密度減小、保衛(wèi)細胞增大、保衛(wèi)細胞內(nèi)葉綠體數(shù)目增多等多倍體的一般特征.但葉片呈現(xiàn)出先變圓而后恢復的現(xiàn)象,節(jié)間長度也呈現(xiàn)出先變短而后恢復的現(xiàn)象.6酸棗四倍體最佳增值培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基激素種類與濃度配比分別為:MS+BA2.5mg/L+IBA0.2~0.6mg/L,增殖系數(shù)為3.6;1/2 MS+IBAl.0mg/L,生根率為100%.冬棗四倍體最佳增

5、值培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基分別為:MS+BA3.5mg/L+IBA0.2~0.6mg/L,增殖系數(shù)為3.2;1/2 MS+IBA2.0mg/L,生根率為100%.7四倍體組培苗對玻璃化的抗性明顯高于二倍體,酸棗對玻璃化的抗性明顯高于冬棗.在培養(yǎng)基中添加2g/L的聚乙烯醇,可顯著提高正常苗率,酸棗二倍體正常苗率由57.5%上升到95.0%;酸棗四倍體由80.0%上升到100%.冬棗二倍體和四倍體正常苗率分別由47.5%和70.0%上升到97.5